Analisis PCR (diagnosis) tuberkulosis

Tuberkulosis atau konsumsi - salah satu penyakit menular paling populer di abad ke-21. Patogennya adalah mikrobakteri khusus - stik Koch.

Penyakit ini menyebar tidak hanya ke paru-paru, tetapi juga ke otak, pencernaan, sendi atau tulang belakang, sistem kemih, dan kulit.

Menurut WHO, 10 juta orang menderita TBC setiap tahun, yang 3 juta di antaranya fatal.

Situasi ini sangat menyedihkan di wilayah negara-negara CIS, di sini epidemi TB terjadi secara berkala. Rusia, Kazakhstan, Ukraina dikepalai oleh peringkat yang menyedihkan tentang penyebaran infeksi ini.

Infeksi mudah ditularkan oleh tetesan udara atau melalui sistem pencernaan, mempengaruhi organ vital, dan juga dapat dengan cepat beradaptasi dengan obat polimer dan kemoterapi.

Salah satu faktor utama keberhasilan pengobatan TB adalah deteksi infeksi yang tepat waktu.

Metode diagnostik

Manusia telah menemukan banyak metode untuk mengenali penyakit berbahaya. Diagnosis TBC dibagi menjadi instrumen dan laboratorium.

Dalam kasus pertama, tes darah untuk TBC, serta dahak, urin.

Kelompok kedua adalah penelitian menggunakan sinar-X dan endoskopi. Metode instrumental untuk mendiagnosis TB, pada gilirannya, adalah radiasi dan pembedahan.

Jenis metode radiasi untuk menemukan penyakit

• Fluorografi adalah metode mendiagnosis penyakit yang dikenal oleh setiap penduduk CIS. Dengan menggunakan rontgen, paru-paru dan kelenjar getah bening hilar diperiksa.
• Rontgen dada - mirip dengan fluorografi, tetapi metode yang lebih baik untuk mendeteksi infeksi. Gambar diperoleh secara lebih rinci dan dalam dua proyeksi, tetapi prosedur ini sekitar enam kali lebih mahal. Biasanya digunakan setelah kecurigaan serius dari penyakit muncul.
• Computed tomography dilakukan sebagai diagnosis tambahan, juga digunakan setelah alasan yang baik untuk adanya infeksi.

Metode diagnosis bedah termasuk endoskopi bronkial, serta mediastinoscopy dan thoracocoscopy.

Metode pertama adalah mempelajari pohon bronkial paru-paru dengan bantuan "pemeriksaan" pada organ ini. Dua metode yang tersisa memungkinkan untuk mempelajari bagian pleural paru dengan menusuk dada.

Ketiga metode ini adalah intervensi bedah serius dan paling sering digunakan dalam proses perkembangan penyakit.

Tes laboratorium meliputi:

• Analisis dahak untuk basil tuberkel.
• Pemeriksaan mikroskopis.
• Diagnosis PCR tuberkulosis

Apa itu diagnosis PCR?

Salah satu metode paling canggih dalam diagnosis laboratorium spesialis infeksi adalah reaksi berantai polimerase.

Metode ini dikembangkan oleh ilmuwan terkenal AS Carrie Mullis pada tahun 1983, di mana ia memenangkan Hadiah Nobel.

Analisis PCR adalah isolasi partikel DNA dari dahak, darah, cairan serebrospinal, tinja, dll. untuk biosintesis mereka selanjutnya.

Dengan bantuan studi genetik molekuler yang kompleks, sifat mikroba dalam tubuh pasien ditentukan.

Jenis analisis untuk TB ini dilakukan dalam beberapa tahap:

• Pertama, sampel biologis diambil. Bahan ditempatkan dalam wadah khusus dan dikirim ke laboratorium.
• Di pusat penelitian, analisis dipanaskan hingga 97 derajat. Ini memungkinkan untuk menghancurkan struktur genom DNA mikroorganisme, yang terdiri dari beberapa rantai.
• Suhu secara khusus diturunkan sehingga primer (peserta DNA dari mana proses biosintesis dimulai) dapat terhubung ke rantai asam deoksiribonukleat apa pun.
• Setelah itu, biosintesis molekul yang diperlukan untuk deteksi dilakukan.

Setelah 25-30 siklus berulang dalam proses penelitian laboratorium, dokter memiliki kesempatan untuk mengenali apakah mikroorganisme menular ada di tubuh pasien atau tidak.

Keuntungan dan kerugian

PCR untuk TBC adalah teknik diagnostik paling modern. Metode ini memungkinkan untuk mendeteksi infeksi pada setiap tahap dengan keandalan tinggi. Manfaat:

• Kecepatan - belajar tidak lebih dari lima jam. Hasil tes untuk mikroba tuberkulosis dapat ditemukan dalam waktu 24 jam.
• Keselamatan - Metode PCR tidak memiliki kontraindikasi usia.
• Ketepatan waktu - teknik ini memungkinkan Anda untuk mendeteksi TB pada tahap-tahap tersebut ketika penyakit tidak memiliki gejala.
• Tingkat akurasi yang tinggi - jika hanya ada beberapa mikroorganisme dalam analisis, mereka akan ditemukan menggunakan reaksi berantai polimerase. Juga, teknik ini memungkinkan untuk dengan mudah mengidentifikasi agen penyebab TBC.
• Keserbagunaan - diagnostik digunakan tidak hanya untuk mendeteksi konsumsi, tetapi juga untuk penyakit lain seperti klamidia, gonore, dll.

Meskipun ada banyak keuntungan, penggunaan teknik ini dalam praktik medis domestik adalah pengecualian daripada aturan. Ada sejumlah alasan untuk ini.

Kerugian dari metode ini adalah:

• Tingginya biaya survei.
• Metode ini tidak cocok untuk mereka yang telah menjalani terapi, karena keberadaan bakteri Koch yang mati dapat menyebabkan hasil positif palsu.
• Dalam kasus mutasi mikroorganisme menular, genom mereka tidak dapat dikenali dengan membuat kesimpulan yang salah.
• Penting untuk memilih lingkungan deteksi yang tepat. Misalnya, hasil tes darah untuk PCR untuk tuberkulosis (entri pengenceran) akan negatif jika sistem saraf terinfeksi.
• Tidak selalu mungkin untuk menerapkan metode ini pada pasien yang didiagnosis dengan lesi paru-paru.

Selain itu, analisis tuberkulosis semacam itu membutuhkan peralatan modern yang tidak dimiliki 90 persen rumah sakit. Dalam CIS, analisis tersebut dapat dilakukan oleh jaringan klinik Invitro.

Ketentuan analisis

Rekomendasi untuk pasien yang menjalani tes untuk TB bervariasi tergantung pada jenis analisis yang mereka lewati.

Ketika mengambil darah untuk PCR, perlu untuk berhenti merokok satu jam sebelum prosedur, bagi dua orang untuk berhenti minum minuman beralkohol dan makanan berlemak.

Dianjurkan juga untuk menahan diri dari aktivitas fisik, juga tidak mungkin untuk mengambil darah untuk TBC saat perut kosong.

Saat mengambil swab dari mulut dan rongga hidung, Anda tidak dapat makan 2-4 jam sebelum prosedur, jika tidak maka tidak akan informatif. Juga, jangan minum alkohol.

Untuk pembacaan yang akurat, analisis dilarang merokok lebih awal dari satu jam sebelum prosedur. Pada malam hari, jangan menyikat gigi dan menggunakan semprotan dan semprotan mulut.

Jika Anda mencurigai tuberkulosis pada sistem urogenital, pasien selama 2-3 hari sebelum melahirkan harus mengecualikan seks, selama 2-3 jam sebelum prosedur, jangan pergi ke toilet "dengan cara kecil". Organ genital harus dicuci dengan air putih tanpa alat khusus.

Wanita disarankan untuk tidak menggunakan tablet vagina, lilin, bola, dan juga untuk menahan diri dari pengujian pada hari-hari kritis.

5 hari sebelum melahirkan, hasilnya perlu untuk meninggalkan prosedur kolposkopi, serta USG transvaginal,

Kapan diagnostik PCR digunakan?

Tidak setiap klinik memiliki diagnosis yang sedemikian kompleks, tetapi dokter semakin menggunakan metode penelitian seperti itu. Biasanya analisis semacam ini dilakukan dalam situasi khusus.

• Dalam hal hasil manta yang meragukan, tes darah untuk TBC dapat digunakan.
• Dalam kasus di mana pasien telah melakukan kontak dengan orang yang terinfeksi, tetapi dokter yang hadir tidak dapat secara akurat menentukan diagnosis.
• Dalam kasus operasi darurat, ketika itu perlu untuk mengetahui dalam waktu singkat apakah pasien memiliki infeksi ini.
• Ketika seorang pasien hamil, ketika metode penelitian lain tidak cukup aman untuk bayi yang baru lahir.

Perlu dicatat bahwa diagnosis ini direkomendasikan untuk anak-anak karena keamanannya.

Jika seorang siswa memiliki kontraindikasi terhadap tes TBC, ia dapat mengambil tes darah untuk TBC alih-alih mantel dengan PCR.

Ada kontraindikasi pada tes Mantoux? Analisis PCR untuk TBC akan dilakukan.

TBC adalah penyakit berbahaya yang dapat berhasil diobati dengan diagnosis tepat waktu.

Salah satu studi paling informatif untuk mengidentifikasi penyakit pada tahap awal disebut metode PCR (polymerase chain reaction).

Analisis PCR tidak hanya yang paling informatif, tetapi juga salah satu studi yang paling mudah diakses yang dapat mendeteksi TB pada tahap awal.

Apa itu analisis PCR?

Semua mikroorganisme hidup, termasuk virus dan bakteri, mengandung molekul RNA dan DNA dalam strukturnya. Dengan menyoroti asam-asam ini, dimungkinkan untuk mengatakan dengan sangat pasti agen asing yang ada dalam darah manusia dan membuat diagnosis yang akurat.

Inti dari metode PCR adalah pemrosesan khusus sampel cairan biologis, sehingga memungkinkan untuk menentukan spesies mana yang termasuk dalam mikroorganisme.

Analisis PCR untuk TBC: indikasi, kelebihan dan kekurangan

Teknik PCR digunakan pada orang dengan lesi paru-paru yang parah dalam kasus tersebut dan manifestasi pernapasan (batuk parah, hemoptisis), ketika tidak mungkin untuk secara akurat mendiagnosis penyakit dengan gejala klinis.

Dianjurkan untuk menjalani penelitian dan setelah kontak langsung dengan pembawa penyakit. Keuntungan yang ia miliki meliputi:

• kecepatan eksekusi - untuk mendapatkan hasil, Anda tidak perlu menumbuhkan budaya patogen atau melakukan prosedur rumit lainnya;
• sangat informatif - ketika mendiagnosis TB, keakuratan analisis mencapai 90% dan lebih tinggi;
• sensitivitas dan spesifisitas tinggi - untuk mengidentifikasi patogen dalam bahan mungkin hanya mengandung satu sel virus;
• universalitas - hampir semua cairan biologis cocok untuk analisis: dahak, darah, lava bronkial.

Sebagai perbandingan: keakuratan mikroskopi sputum smear, yang digunakan untuk mendeteksi tuberkulosis, hanya 40-50%, dan dengan jumlah patogen yang rendah berkurang hingga 10% atau kurang. Budaya dahak lebih informatif, tetapi butuh 2 hingga 8 minggu untuk mendapatkan hasil.

Anda dapat menggunakan PCR untuk TBC alih-alih Mantoux, jika orang tersebut memiliki kontraindikasi terhadap sampel.

Kerugian dari teknik ini termasuk risiko mendapatkan hasil negatif palsu. Dengan kata lain, tidak adanya DNA spesifik dalam dahak, darah atau urin belum mengindikasikan tidak adanya tuberkulosis pada pasien.

Itu penting. Dalam diagnosis TBC pada anak-anak, sensitivitas analisis PCR lebih rendah daripada orang dewasa, dan sekitar 25-83%.

Foto 1. Melakukan PCR sebagai ganti Mantoux pada anak adalah pilihan yang baik jika ia alergi atau sering sakit.

Prosedur untuk analisis PCR

Prosedur untuk melakukan analisis PCR dilakukan dengan menggunakan alat khusus yang disebut amplificator, dan terdiri dari empat tahap. Untuk penelitian, bagian DNA diperlukan dari mana sintesis molekul dimulai, nukleotida (basis molekul DNA), serta polimerase, atau enzim yang mempercepat prosedur.

1. Pengumpulan bahan biologis (dahak, darah, lavage bronkial).
2. Pemanasan sampel hingga suhu sekitar 98% untuk menghancurkan struktur utama rantai DNA.
3. Annealing, atau menurunkan suhu beberapa derajat untuk mengikat primer ke untai DNA.
4. Sintesis molekul diperlukan untuk menghasilkan suatu hasil.

Setelah melakukan 25-30 siklus semacam itu, sejumlah salinan DNA virus terbentuk, yang dengannya mudah untuk menentukan agen penyebab penyakit.

Perhatian: analisis PCR tidak membedakan mikroorganisme "mati" dari "hidup", oleh karena itu hasilnya dapat positif untuk waktu tertentu setelah perawatan.

Persiapan untuk analisis

Jika tes darah PCR diambil untuk TBC, maka tidak perlu pelatihan khusus, tetapi pasien disarankan untuk mengikuti aturan umum: jangan makan setidaknya 8 jam, hilangkan alkohol dan minum obat, jangan merokok selama satu jam sebelum mengambil bahan.

Dahak dikumpulkan di pagi hari setelah disikat dan dibilas dengan seksama.

Jika eksudat diekskresi dengan buruk, Anda harus mengambil ekspektoran malam sebelumnya atau mengambil inhalasi. Dahak dengan lendir, nanah, bercak putih atau kekuningan memiliki nilai diagnostik.

Jika tidak mungkin untuk mengambil dahak untuk analisis, usap bronchio digunakan untuk mengidentifikasi patogen. Analisis semacam itu tidak memerlukan persiapan, dan bahan diambil sebagai berikut. Dengan bantuan alat suntik laring, pasien dituangkan ke dalam trakea, larutan natrium klorida, yang menyebabkan cairan batuk - batuk yang kuat digunakan untuk penelitian.

Perhatian Hasil analisis mendistorsi antibiotik, heparin dan obat lain yang digunakan untuk pengobatan lokal, sehingga studi ini direkomendasikan 10-14 hari setelah pemberian.

Reaksi berantai polimerase untuk TBC

Analisis PCR untuk TBC memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi penyakit pada setiap tahap perkembangan dengan jumlah minimum mikobakteri atau bahkan jika ada fragmen dalam tubuh manusia oleh DNA patogen.

Apa itu PCR?

PCR muncul relatif baru-baru ini. Pada tahun 1983, metode ini dibuat oleh ahli mikrobiologi Amerika, Carey Mullis, yang menerima Hadiah Nobel. Basis PCR adalah penggandaan berulang dari wilayah DNA tertentu dengan bantuan enzim in vitro. Sebagai hasilnya, DNA patogen modis untuk divisualisasikan bahkan dalam kehadirannya dalam jumlah minimal (jejak kehadiran). Ini adalah standar khusus emas.

Tuberkulosis PCR (proses rantai polimer) adalah prosedur diagnostik untuk mendeteksi infeksi menggunakan rekayasa genetika. Metode penelitian ini digunakan di laboratorium medis mikrobiologis, virologi, dan imunologi yang meragukan dan praktis tidak menjanjikan dalam hal kasus diagnosis.

Apa yang dibutuhkan untuk analisis?

Analisis ini membutuhkan 3 komponen:

• Sampel DNA.
• Senyawa nukleotida.
• Enzim polimerase

Analisis diserahkan ke laboratorium sebagaimana ditentukan oleh dokter yang merawat.

Apa dasar dari metode ini?

Pada awal survei, segmen DNA mikroba diekstraksi dari biofluid.

PCR menentukan tipe patogen, 2-3 jam setelah tes. Namun, tidak perlu diisolasi dari bahan biologis atau tumbuh untuk waktu yang lama di laboratorium. Yang utama adalah bahwa sampel tersebut mengandung sepotong DNA yang terinfeksi. Selama analisis TBC dibuat sintesis buatan infeksi asam ribonukleat secara in vitro. Karena reaksi cepat setelah beberapa jam, Anda bisa mendapatkan hasil yang andal.

Tahapan diagnosis

Tuberkulosis PCR adalah metode diagnostik sederhana yang memungkinkan Anda mendapatkan jawaban dalam waktu singkat. Untuk menentukan tbc, bahan biologis dari orang yang terinfeksi (darah, dahak, cairan biologis) diambil.

Diagnosis terjadi dalam tiga tahap utama:

• Setelah pengambilan sampel di laboratorium, bentuk utama DNA dihancurkan. Pada suhu 980 derajat, 1,5 rantai dipisahkan dalam 1,5 menit.
• Pada tahap selanjutnya, anil dilakukan, suhu udara dikurangi oleh beberapa divisi, DNA terhubung ke primer.
• Tahap terakhir dari penelitian ini disebut perpanjangan. Ini adalah biosintesis molekul.

Untuk mengidentifikasi DNA yang diinginkan dengan partikel infeksi, diagnostik dapat dilakukan 20-25 kali.

Apakah perlu melakukan PCR untuk TBC?

Analisis PCR untuk TBC selalu dilakukan ketika ada kebutuhan untuk itu, itu termasuk dalam standar kualitas memeriksa pasien untuk TBC. Untuk melakukan itu, Anda hanya perlu rujukan dari dokter Anda. Paling sering, di poliklinik, metode diagnostik lain digunakan untuk menentukan TBC.

Ini termasuk:

• Mempertanyakan dan mengumpulkan anamnesis.
• Pemeriksaan kesehatan.
• Tes tuberkulin Mantoux.
• Sinar-X atau fluorografi.
• Ultrasonografi.
• Diagnosis mikroskopis spesimen dahak.

Meskipun banyak alat diagnostik, jumlah yang terinfeksi setiap tahun terus bertambah. Selain itu, patologi telah memperoleh beberapa fitur: tingkat keparahan proses, peningkatan hasil yang mematikan, dan kekebalan patogen terhadap obat-obatan.

Dokter tidak merekomendasikan meninggalkan inspeksi dan vaksinasi tahunan, karena hal ini meningkatkan risiko terinfeksi. Analisis PCR memiliki banyak keuntungan, sehingga dianggap paling akurat dan informatif dari semua metode instrumental untuk mendeteksi tbc dan banyak digunakan di klinik modern.

Apa nilai metode ini?

Proses rantai polimer sering digunakan bersama dengan metode tambahan untuk mendeteksi infeksi TBC. Nilai dari metode ini adalah sebagai berikut:

• Waktu memegang yang singkat. Sudah setelah 2-3 jam setelah donor darah, adalah mungkin untuk mendeteksi keberadaan infeksi dalam bahan biologis. Ini sangat diperlukan dalam kasus di mana ada pertanyaan tentang hidup dan mati, dan Anda perlu mengidentifikasi diagnosis yang tepat untuk intervensi bedah.
• Beberapa metode diagnostik memiliki kontraindikasi sendiri dan tidak selalu menampilkan gambaran lengkap diagnosis. Dengan bantuan PCR, patogen terdeteksi dengan segera, dan dimungkinkan untuk melakukan prosedur untuk orang-orang dari segala usia.
• Sebagai sampel, Anda dapat mengambil bahan biologis yang terinfeksi. Untuk menentukan bentuk penyakit paru-paru, diambil urin atau saliva. Sampel darah membantu mengidentifikasi semua bentuk patologi. Cairan tulang belakang diperlukan untuk menentukan meningitis tuberkulosis.
• Metode keamanan. Untuk penelitian hanya membutuhkan bahan biologis pasien. Karena itu, prosedur ini sepenuhnya aman dan tidak berbahaya bagi anak-anak dan orang dewasa, tidak seperti fluorografi, yang dilakukan sejak usia 18 tahun, dan Mantoux, yang menyebabkan reaksi negatif dalam tubuh.
• Tes sangat sensitif. Itu memungkinkan untuk mengidentifikasi patologi bahkan pada tahap awal perkembangan, ketika virus belum menyerang semua sel-sel tubuh.
• Metode yang efektif untuk diagnosis kekambuhan patologi.
• Cara inovatif untuk mengidentifikasi tongkat Koch dari hari-hari pertama pengembangannya. Ini memungkinkan Anda untuk segera memulai perawatan yang benar dan menyelamatkan seseorang dari kematian. Pada tahap awal perkembangan, patologi dapat disembuhkan sepenuhnya tanpa komplikasi.

Metode diagnosis ini memiliki banyak keuntungan dan secara aktif digunakan di berbagai lembaga medis. Namun, meskipun memiliki kelebihan, PCR juga memiliki fitur negatif.

Apa kerugiannya?

Kerugian dari proses rantai polimer meliputi:

• Tingginya biaya prosedur.
• Metode ini tidak cocok untuk mereka yang telah menjalani pengobatan tbc, karena sel-sel infeksi yang mati dapat memberikan hasil positif palsu.
• Ketika mutasi sel-sel DNA bisa menjadi hasil yang salah.
• Spesialis harus benar mengambil bahan biologis yang diperlukan untuk menentukan jenis infeksi dan tempat pelokalannya.
• Tidak selalu diizinkan untuk pasien dengan penyakit paru-paru.

Siapa yang menunjukkan analisisnya?

Paling sering, analisis semacam itu ditugaskan:

• • Jika hasil Mantoux memberikan data yang meragukan, darah diambil dari vena untuk TBC.
  • Pasien memiliki kontak dengan orang yang terinfeksi, tetapi pemeriksaan medis tidak membantu menentukan diagnosis yang benar.

• Selama operasi darurat, di mana Anda perlu tahu dalam waktu singkat apakah pasien terinfeksi.
• Selama kehamilan, ketika metode diagnostik lainnya tidak dapat memberikan hasil yang akurat tanpa membahayakan janin.

Setelah memeriksa semua kelebihan dan kekurangan dari mendiagnosis tbc, kita dapat menyimpulkan bahwa yang terbaik adalah menggunakan beberapa metode diagnostik sekaligus untuk membuat diagnosis yang akurat. Ini akan membantu memastikan bahwa ada infeksi di dalam tubuh dan pada tahap perkembangan apa itu. Setelah menetapkan diagnosis dengan benar, dimungkinkan untuk memulai pengobatan konservatif cepat dan menyelamatkan seseorang dari kematian.

Apa PCR untuk TBC dan bagaimana melakukan tes?

PCR untuk TBC diresepkan ketika tidak mungkin untuk membuat diagnosis atau tidak mungkin untuk melakukan penelitian lain. Analisis memungkinkan untuk mengidentifikasi tongkat Koch pada tahap paling awal dan memulai perawatan tepat waktu.

Deskripsi PCR untuk TBC

Indikasi untuk diagnostik PCR

Jenis PCR untuk TBC

Persiapan untuk analisis

Bagaimana PCR untuk TBC?

Interpretasi hasil survei

Keunikan PCR untuk TBC pada anak-anak

Berapa biaya PCR untuk TBC?

Komentar dan Ulasan

Deskripsi PCR untuk TBC

PCR (reaksi berantai polimerase) untuk tuberkulosis adalah analisis akurat yang dapat mendeteksi tongkat Koch dalam beberapa jam. Diagnostik didasarkan pada metode rekayasa genetika. Dokter mengisolasi sel DNA, menggunakan tes gen-molekuler untuk menentukan jenis patogen.

Keuntungan dari metode ini

• memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi patogen pada tahap awal, tanpa manifestasi dari gejala yang terlihat;
• diagnostik tidak memiliki kontraindikasi dan diizinkan untuk anak-anak;
• penelitian dapat dilakukan untuk mengambil jumlah minimum materi.
• universalitas penelitian biomaterial;
• Penelitian ini efektif dalam menentukan kekambuhan penyakit.

Kekurangan dari metode ini

Seiring dengan kelebihannya, studi PCR juga memiliki kekurangan.

Yang utama adalah:

1. Ruang belajar tidak ada di mana pun Anda bisa lulus. Karena peralatan untuk diagnosis semacam itu mahal, ia dipasang di laboratorium berbayar.
2. PCR untuk TBC dapat memberikan respons positif jika mendeteksi mycobacteria yang mati, misalnya, setelah perawatan.
3. Mutasi patogen secara signifikan mengurangi efektivitas metode PCR, karena untai DNA tidak mampu mensintesis secara berurutan.
4. Kebutuhan untuk hati-hati memilih biomaterial untuk dianalisis.

Indikasi untuk diagnostik PCR

Kirim ke survei untuk indikasi berikut:

1. Jika ada setidaknya satu kontak dengan pasien dengan TB dan sulit untuk mengidentifikasi penyakit menggunakan tes standar.
2. Ada beberapa situasi ketika tidak mungkin membawa seseorang untuk rontgen atau studi lain. Dalam kasus seperti itu, jauh lebih mudah untuk mengeluarkan dahak.
3. Analisis diangkat pada malam operasi yang akan datang, ketika perlu untuk menentukan apakah seseorang sakit atau tidak.
4. Jika pasien memiliki hasil yang meragukan dari reaksi Mantoux.
5. Menugaskan wanita hamil dan anak-anak untuk menghindari paparan sinar-X.

Jenis PCR untuk TBC

Pilihan biomaterial untuk skrining untuk TB harus ditunjuk secara individual.

Untuk diagnosis PCR untuk TBC dapat mengambil tes:

Tes darah

Fitur tes darah untuk TBC:

1. Dilakukan dalam kasus-kasus di mana diagnostik lain tidak cocok atau dikontraindikasikan. Misalnya, untuk membuat diagnosis yang benar, Anda perlu mengambil lebih dari satu gambar sinar-X. Paparan berlebih tidak aman bagi tubuh, sehingga jauh lebih mudah untuk mengambil darah dari pasien.
2. Juga, dokter dapat memberikan arahan kepada darah ketika menerima hasil yang kontroversial setelah fluorografi.

Analisis air liur

1. Analisis air liur kurang populer dan informatif daripada penelitian lain, karena TBC tidak mempengaruhi kelenjar ludah. Karena itu, dalam banyak kasus, hasilnya akan negatif.
2. Metode ini bertujuan untuk mengidentifikasi bentuk paru dan ekstrapulmoner.
3. Jika warna sampel tidak berubah di bawah aksi reagen, ini berarti tidak ada patogen. Namun, jika kecurigaan suatu penyakit muncul, maka dilakukan analisis kompleks tambahan.

Analisis dahak

Analisis dahak adalah yang paling informatif untuk mendeteksi patogen tuberkulosis. Sampel diambil beberapa kali, sebagai aturan, tiga kali sudah cukup. Ini menghilangkan kemungkinan kesalahan dalam mendapatkan bahan berkualitas buruk.

Jika seseorang terinfeksi TBC, dahak dalam jumlah kecil akan dilepaskan bersamaan dengan batuk. Pada pasien dalam stadium lanjut penyakit, lendir akan diekskresikan dengan bercak berdarah.

Tidak dianjurkan untuk mengambil dahak untuk pemeriksaan jika pasien memiliki kecurigaan tuberkulosis tulang atau sistem saraf.

Analisis urin

Urinalisis adalah salah satu cara untuk mendeteksi bentuk penyakit luar paru: TBC ginjal dan sistem kemih.

Dalam kasus bentuk paru penyakit, analisis umum urin praktis tidak informatif, karena tidak ada perubahan patologis yang nyata yang diamati.

Dari video Anda akan menemukan dokter mana yang membuat diagnosis TBC. Difilmkan oleh saluran TBC. ru.

Persiapan untuk analisis

Saat melakukan tes darah, PCR harus mengikuti beberapa aturan untuk mendapatkan hasil yang andal:

• Dianjurkan untuk melakukan analisis pada perut kosong;
• harus mengecualikan alkohol pada malam survei;
• Anda harus selesai minum antibiotik 15-20 hari sebelum analisis;
• Disarankan untuk tidak merokok selama satu jam sebelum pengumpulan darah.

Saat mengambil dahak untuk pemeriksaan, Anda juga disarankan untuk mengikuti beberapa aturan:

• bahan dikumpulkan di pagi hari, oleh karena itu, mereka menyikat gigi dan benar-benar membilas rongga mulut;
• jika dahak tidak bergerak dengan baik, disarankan untuk mengambil ekspektoran di malam hari atau menarik napas;
• Penting untuk berhenti minum antibiotik 15 hari sebelum pemeriksaan.

Untuk mendapatkan hasil analisis urin yang dapat diandalkan, pasien disarankan untuk mematuhi aturan berikut:

• bahan harus dikumpulkan di pagi hari;
• pada malam hari, tidak disarankan untuk makan makanan yang dapat mengubah warna cairan (bit, blueberry dan lainnya);
• Berhenti minum antibiotik selama 15 hari sebelum pemeriksaan.

Bagaimana PCR untuk TBC?

Fitur asupan bahan:

1. Tes darah diambil dari pasien di pagi hari dari vena di laboratorium.
2. Untuk pengiriman dahak pada lendir, perlu dari laring, dan lebih disukai tanpa jumlah air liur yang besar. Pasiennya harus meludah ke wadah steril khusus, kemudian menyerahkannya ke ruang kerja.
3. Dokter mengambil kerokan dengan alat khusus dari mukosa pipi.
4. Air seni disewa dalam wadah khusus. Ambil bagian tengah porsi pagi.

Reaksi genetik molekuler oleh PCR dilakukan menggunakan perangkat khusus yang disebut amplificator. Untuk mempelajari segmen DNA yang diperlukan, yang memulai sintesis molekul.

Teknik ini terdiri dari empat tahap:

1. Awalnya, biomaterial yang dibutuhkan dikumpulkan untuk penelitian (darah, dahak dan air liur).
2. Kemudian sampel dipanaskan pada suhu hingga 98 derajat dan tidak lebih dari dua menit. Dengan demikian, bentuk utama genetika DNA dihancurkan dan dua rantai terbentuk.
3. Berikutnya adalah anil atau penurunan suhu, yang menyebabkan primer mengikat untai DNA.
4. Tahap terakhir disebut elongasi. Ini adalah sintesis molekul, yang mengarah pada hasil akhir.

Anda perlu menghabiskan 25-30 siklus seperti itu untuk mendapatkan jumlah salinan DNA virus tertentu. Agen penyebab penyakit ditentukan oleh mereka.

Konten informasi dan keandalan diagnosa PCR adalah 100%.

Interpretasi hasil survei

Waktu produksi analisis adalah sekitar 5-6 jam.

Diagnostik dengan metode PCR memberikan 2 varian hasil:

1. Terdeteksi Dalam materi yang diselidiki, DNA dari agen TB terdeteksi. Probabilitas infeksi adalah 97%. Pasien tersebut dengan cepat dikirim ke apotik TB, di mana pengobatan akan dilakukan.
2. Tidak terdeteksi Respons negatif menunjukkan tidak adanya agen penyebab.

Jika hasilnya positif, dokter akan melakukan decoding secara terperinci, yang menentukan tahap dan fokus penyakit.

Galeri Foto

Keunikan PCR untuk TBC pada anak-anak

PCR diresepkan jika hasil tes Mantoux tidak pasti atau dicurigai infeksi. Memberikan prosedur ini aman untuk anak-anak.

Analisis PCR untuk TBC

Analisis PCR untuk TBC adalah yang paling populer di antara penelitian medis di bidang penyakit ini.

Tapi bagaimana cara memperingatkan diri sendiri dan orang yang Anda cintai dari penyakit mengerikan ini? Bagaimana cara lulus tes yang diperlukan untuk PCR?

Gejala TBC dan pencegahannya

Para ahli mengatakan bahwa sekitar 30% dari total populasi menderita TBC.

Persentase tertinggi penyakit ini dikembangkan di negara-negara yang belum berkembang. Ini paling sering terjadi sebagai akibat berkurangnya kekebalan pada manusia.

Penyakit ini adalah salah satu yang tertua. Penyakit ini dapat ditemukan di lapisan otak, di saluran pencernaan, di sendi dan tulang belakang, di sistem kemih dan di area kecil di kulit manusia.

Para ahli paling mudah menentukan kulit yang terkena. Di situs ada segel kecil, yang seiring waktu ukurannya bertambah, pecah dengan cairan keputihan.

Agen penyebab TBC paling sering dapat diambil ketika berbicara dengan orang yang sakit, ketika mereka batuk atau bersin. Biasanya, penyakit ini berlanjut tanpa gejala atau memiliki bentuk terbuka, tetapi diagnosis PCR tentang tuberkulosis memungkinkannya untuk dideteksi pada tahap awal dan dalam kasus darurat.

Gejala penyakit: batuk basah berkepanjangan, demam, menggigil, berkeringat berlebihan di malam hari, penurunan berat badan yang tajam, perasaan lelah dan lemah.

Bentuk terbuka dari penyakit ini adalah yang paling berbahaya. Seseorang yang menderita TBC dapat menginfeksi orang sehat.

Gejala terpenting penyakit paru adalah hemoptisis. Itu terjadi dalam segala bentuk penyakit.

Dalam beberapa situasi, ini dapat menyebabkan pendarahan dari paru-paru seseorang. Ini sangat berbahaya dan membutuhkan intervensi medis yang mendesak.

Untuk pencegahan dan pengenalan TBC, para ahli meresepkan: sampel - tes TBC, pemeriksaan bahan biologis, fluorografi, sinar-X dan tes darah, dahak atau air liur.

Diagnosis penyakit

Diagnosis penyakit yang diperbaiki - ini adalah benar dan selama perawatan dimulai. Dalam kebanyakan kasus, metode yang biasa untuk mendeteksi patogen tidak selalu memiliki efek dan sudah usang.

Cara paling penting untuk mengidentifikasi dan mendiagnosis penyakit paru adalah tes pemeriksaan medis. Biasanya menggunakan diagnostik PCR. Survei ini ditemukan baru-baru ini, pada tahun 1983, oleh ahli biokimia Amerika, Mullis.

Tes pada pasien dengan tuberkulosis paru dilakukan secara eksklusif dalam kasus-kasus khusus ketika sulit untuk menegakkan diagnosis atau tidak mungkin untuk mendeteksi penyakit dengan cara instrumental.

Reaksi berantai polimerase adalah metode PCR yang andal. Analisis ini memungkinkan untuk menentukan agen penyebab berapa banyak dalam darah, urin dan cairan sumsum tulang belakang. Pemeriksaan medis semacam itu adalah yang paling aman.

Analisis PCR memberikan hasil 100%.

Ini memiliki sensitivitas tinggi, yang membantu mengenali penyakit untuk pertama kalinya setelah infeksi, sebelum gejala penyakit muncul. Metode analisis ini memberikan hasil dalam beberapa jam setelah pengiriman bahan biologis. Penaburan analisis ini dilakukan tiga kali, tetapi aspirasi perut yang sakit hanya dilakukan di rumah sakit.

Tiga kriteria dikembangkan untuk menentukan hasil: akurasi tinggi, sensitivitas hingga 90%, spesifisitas.

Tes untuk PCR digunakan dalam beberapa kasus:

1. untuk mendiagnosis TB paru;
2. menentukan sumber penyakit;
3. definisi lokalisasi ekstrapulmoner;
4. diagnosis kekambuhan.

Mengevaluasi hasilnya, dan meresepkan perawatan medis yang benar, hanya dapat spesialis. Sangat penting untuk menetapkan skema perawatan medis yang benar untuk mendeteksi TB, perlu melakukan tes untuk kerentanan patogen terhadap perangkat anti-TB.

Berbagai tes kesehatan TBC

Anda dapat mengambil analisis yang diperlukan dalam dua cara: mengambil darah atau air liur dari seseorang atau mengambil dahak.

Tes darah oleh PCR dapat dari dua jenis: ELISA dan PCR. Studi semacam itu membantu memantau keefektifan perawatan medis.

ELISA membantu menemukan antibodi dalam tubuh manusia yang melawan mikroba TBC. Penelitian ini dilakukan sekali sehari. Kerugian utama adalah sensitivitasnya yang rendah, yang memungkinkan untuk menentukan hanya penyakit dengan tingkat infeksi yang rendah.

Penelitian yang paling populer dan efektif adalah analisis pada mycobacterium tuberculosis. Dengannya, dokter dapat dengan mudah menemukan DNA bakteri dalam darah manusia. Metode ini juga digunakan untuk menentukan jumlah bakteri, untuk mengontrol perawatan pasien, untuk mendeteksi kekambuhan dini.

Air liur PCR adalah salah satu metode penelitian paling maju. Analisis semacam itu akan membantu mengidentifikasi bakteri menular dalam saliva. Menggunakan PCR meningkatkan jumlah fragmen DNA dari mikroba berbahaya.

Metode kultur dimaksudkan untuk pemeriksaan sputum manusia, untuk mendeteksi mikrobakteri.

Mempersiapkan pengujian PCR

Perhatian, Anda membutuhkan persiapan air liur yang benar untuk PCR. Jika semua resep tidak diikuti, analisis mungkin positif palsu.

Sebelum mengikuti tes, dilarang merokok, minum makanan dan obat-obatan, serta mengonsumsi alkohol selama 12 jam. Dilarang menyikat gigi, Anda tidak bisa menggunakan alat pembilas, penyegar mulut dan benang gigi.

Dilarang menggunakan lipstik dan memasuki hubungan intim. Diizinkan membilas mulut Anda dengan air matang biasa;

Pemeriksaan ini akan membantu mengidentifikasi: herpes, klamidia, tuberkulosis, patogen pneumonia, oncovirus, barolleosis, mononukleosis, HIV, hepatitis dari semua jenis, rubella.

Analisis untuk mikobakteri terutama dilakukan dalam kasus kontroversial, yaitu jika sulit untuk membuat diagnosis atau ada kontak dengan pasien dengan TBC, sebelum memulai operasi, untuk mendeteksi penyakit. Digunakan untuk pemeriksaan wanita hamil, karena metode ini paling aman untuk ibu dan janin.

Kadang-kadang analisis dilakukan di klinik swasta, karena pasien tidak mematuhi aturan untuk pengujian, tetapi pada saat yang sama dia khawatir tentang semua gejalanya. Analisis dapat dilakukan ketika spesialis tidak yakin setelah melakukan tes Mantoux atau pasien adalah anak-anak.

Keuntungan dan kerugian dari tes medis untuk penentuan TBC

PCR adalah cara paling populer dan efektif untuk menentukan penyakit.

Perbedaan terbesar dari penelitian lain adalah hasil yang cepat dan akurat.

Keuntungan dari pemeriksaan medis ini adalah dapat dilakukan untuk penelitian urologis, ginekologi, onkologis, infeksi, hematologi, paru, gastroenterologis dan lainnya.

Keuntungan utama dari studi medis tersebut adalah bahwa tes darah, dahak dan air liur siap dalam waktu singkat (akan membutuhkan 5 jam untuk mendeteksi penyakit). Pemeriksaan medis semacam itu memungkinkan dilakukannya tes ketika metode tertentu mempelajari suatu penyakit dilarang atau tidak dapat diakses. Bagus untuk mendeteksi kekambuhan pada manusia.

Berkat analisis ini, menjadi mungkin untuk melakukan penelitian untuk lingkungan biologis apa pun. Itu diperbolehkan untuk mengambil materi dari anak-anak. PCR memungkinkan untuk mengidentifikasi agen penyebab pada setiap tahap penyakit. Karena sensitivitasnya yang tinggi, mikroba dapat ditemukan walaupun hanya sedikit bakteri yang ada.

Metode PCR memperluas kemampuannya. Ini juga digunakan untuk menentukan ayah, untuk pembuatan gen baru, mutasi, untuk melintasi elemen DNA, dan sebagainya.

Kerugian dari penelitian ini adalah metode survei yang mahal.

Setelah perawatan medis, tes darah dapat menunjukkan adanya patogen hidup atau mati dalam jumlah kecil, setelah pemeriksaan medis, itu akan memberikan hasil positif.

Bakteri dan mikroba dapat mengalami mutasi, setelah itu PCR tidak akan dapat mengidentifikasi dan mengidentifikasi mereka, oleh karena itu, hanya seorang spesialis yang dapat meresepkan studi tentang lingkungan yang diperlukan, jika tidak, pemeriksaan medis semacam itu tidak akan efektif.

Setelah pengujian, ada hasil negatif, tetapi ini tidak mengecualikan kemungkinan seseorang terinfeksi TBC. Pemeriksaan medis semacam itu dilakukan untuk pasien dengan penyakit paru-paru yang parah, ketika studi lain tidak memberikan hasil yang akurat. PCR akan bermanfaat bagi penderita TB paru dan luar paru.

Sayangnya, peralatan medis untuk mendeteksi patogen tuberkulosis sangat mahal.

Rumah sakit umum dan klinik tidak mampu, tetapi klinik berbayar mengambil tes pasien dan memberikan hasil yang siap pakai dalam waktu singkat.

Diagnosis PCR tuberkulosis

TBC adalah infeksi spesifik, fokusnya mungkin pada jaringan manusia selama bertahun-tahun, dan kemudian menyebar selama beberapa bulan. Ini adalah penyakit kronis yang rejimen pengobatan optimalnya sulit dipilih. Salah satu alasan untuk ini adalah keterlambatan diagnosis, ketika mikobakteri, sementara di tubuh manusia, telah beradaptasi dengan banyak obat.

Apa metode diagnosis modern yang ada? Diagnosis PCR - apa itu? Bagaimana penelitian ini dilakukan? Dalam kasus apa TBC didiagnosis dengan metode ini dan apa esensinya?

Apa itu diagnosa PCR

Ini adalah salah satu metode paling modern untuk mendiagnosis tidak hanya penyakit, tetapi juga deteksi bahan biologis. Diagnosis PCR ditemukan relatif baru-baru ini. Sekitar 30 tahun yang lalu pada tahun 1983, seorang ahli biokimia Amerika, Carey Banks Mullis, mengusulkan skema pemulihan yang kompleks untuk bahan biologis mikroorganisme dalam satu segmen pendek. Berkat penemuannya, ilmuwan dianugerahi penghargaan tertinggi - Hadiah Nobel.

Apa itu - PCR diagnosis infeksi? Polymerase chain reaction (PCR) adalah diagnosis deteksi penyakit virus, berdasarkan metode rekayasa genetika. Ini banyak digunakan dalam mikrobiologi medis, imunologi dan virologi. Metode ini bersifat universal dan membantu membuat diagnosis dengan sejumlah kecil bahan. Infeksi dapat dideteksi secara harfiah pada jam-jam pertama infeksi itu, jauh sebelum gejala pertama penyakit muncul.

Metode ini terdiri dari memperoleh dari bahan dari orang yang sakit bukan patogen itu sendiri, tetapi fragmen genom (partikel DNA), biosintesisnya dengan penentuan selanjutnya ke kelas mikroorganisme mana materi genetik yang diperoleh dimiliki dengan menggunakan metode genetik molekuler.

Terlepas dari kenyataan bahwa ini adalah proses yang kompleks, butuh waktu jauh lebih sedikit daripada banyak metode biologis untuk mendeteksi agen infeksi. Hanya dalam beberapa jam, mikroorganisme dapat dideteksi oleh PCR. Untuk melakukan ini, tidak perlu mengisolasinya dari lingkungan (darah, cairan serebrospinal, sputum) dan menumbuhkannya dalam waktu lama pada media nutrisi buatan. Sudah cukup bahwa fragmen kecil untai DNA dari agen infeksi hadir dalam bahan yang diteliti.

Dasar dari reaksi adalah kemungkinan di bawah kondisi buatan (in vitro) untuk membuat sintesis molekul asam nukleat dari agen infeksi.

Apa yang dibutuhkan untuk PCR?

1. Primer adalah segmen DNA dari mana biosintesis atau penciptaan dimulai.
2. Nukleotida atau senyawa kompleks yang menjadi dasar molekul DNA atau RNA.
3. Reaksi rantai polimerase tidak mungkin terjadi tanpa adanya polimerase, yang merupakan enzim yang mempercepat PCR.

Tahapan diagnostik PCR

Bagaimana diagnosis molekuler dilakukan oleh PCR? Prosedurnya sederhana dan membutuhkan waktu singkat, dengan mempertimbangkan pengumpulan materi.

1. Sebelum memulai penelitian, mereka mengambil bahan biologis yang diperlukan - ini adalah air cuci bronkial, darah, isi lambung, dahak. Jenis bahan biologis tergantung pada patogen yang dicurigai.
2. Denaturasi atau penghancuran struktur primer DNA, yang terdiri dari dua rantai. Inti dari tahap ini adalah untuk memisahkan dua sirkuit di bawah pengaruh suhu tinggi (maksimum adalah 98 ºC, yang berlangsung tidak lebih dari dua menit).
3. Pada tahap PCR berikutnya, yang disebut anil, suhu berkurang beberapa derajat sehingga primer akan mengikat untai DNA.
4. Perpanjangan, di mana sintesis molekul yang diinginkan berlangsung secara langsung.

Akibatnya, hanya 25-30 siklus yang menerima jumlah salinan DNA mikroorganisme yang diperlukan, yang mudah dikenali.

Apakah PCR memerlukan diagnosis TB?

Tidak mungkin bagi semua orang yang dicurigai tuberkulosis untuk melakukan PCR, karena metode ini membutuhkan peralatan yang mahal. Tidak semua klinik umum mampu membelinya. Selain itu, kebetulan bahwa metode biasa dalam mendiagnosis infeksi pada kebanyakan kasus juga membenarkan diri mereka sendiri.

Ini termasuk:

• survei pasien, anamnesis;
• pemeriksaan lengkap dari orang tersebut;
• sebuah studi menggunakan tes tuberkulin Mantoux;
• radiografi atau fluorografi;
• diagnostik komputer jika perlu;
• metode penelitian mikrobiologis: pemeriksaan mikroskopik dan pemeriksaan bakteriologis dahak.

PCR untuk TBC dilakukan dalam kasus-kasus khusus ketika sulit untuk membuat diagnosis atau tidak mungkin untuk melakukan metode instrumental lainnya.

Meskipun ada banyak metode diagnostik, kejadian TB terus bertambah. Saat ini, tidak hanya pertumbuhannya, tetapi juga fitur lainnya:

• penyakit ini sering terjadi dalam bentuk yang parah;
• jumlah kasus fatal meningkat;
• semakin resisten terhadap kemoterapi modern didiagnosis bentuk penyakit.

Keengganan orang itu sendiri untuk menjalani pemeriksaan medis rutin setiap tahun, penolakan vaksinasi mengarah pada penyebaran tuberkulosis. Dalam kondisi seperti itu, kita memerlukan metode penelitian yang cepat, informatif dan efektif yang harus dapat diakses oleh anak-anak dan orang dewasa. Semua metode diagnostik di atas jauh lebih rendah daripada PCR.

Manfaat mendiagnosis TB dengan PCR

Penelitian ini, meskipun baru, telah membuktikan dirinya dengan baik, terutama dalam kasus kontroversial di mana tidak mungkin untuk membuat diagnosis karena sejumlah alasan.

Berkat PCR, jauh lebih mudah untuk mendeteksi agen penyebab TBC dalam bahan uji.

Keuntungan dari diagnosa PCR adalah sebagai berikut.

1. Ini adalah analisis cepat. Sebuah fragmen kecil dari molekul DNA dapat digunakan untuk mendiagnosis hanya dalam beberapa jam (sekitar lima), yang berhasil digunakan dalam situasi darurat ketika, misalnya, sebelum operasi perlu untuk menentukan apakah seseorang sakit dengan TBC.
2. Analisis PCR diperbolehkan jika metode lain tidak tersedia atau dilarang (untuk mendeteksi TB paru, kadang-kadang Anda harus mengambil beberapa gambar radiografi, yang akan menjadi radiasi dosis besar).
3. Dengan bantuan PCR, setiap lingkungan biologis diperiksa untuk mengetahui adanya patogen di dalamnya. Misalnya, Anda dapat melakukan penelitian cairan serebrospinal, jika ada kecurigaan meningitis tuberkulosis.
4. Diizinkan diagnosis PCR penyakit menular pada anak-anak, karena metode ini aman.
5. Memungkinkan Anda mengidentifikasi patogen pada setiap tahap penyakit.
6. Sensitivitas PCR yang tinggi memungkinkan untuk mendeteksi Mycobacterium tuberculosis, bahkan jika hanya ada beberapa mikroorganisme dalam bahan biologis.
7. Adalah baik untuk melakukan diagnosis kekambuhan penyakit.

Setelah semua membaca PCR tampaknya metode diagnostik yang hampir sempurna, yang harus membuat semua orang dengan kecurigaan tuberkulosis. Tetapi ada juga kelemahan di sini, mereka harus diperhitungkan.

Kekurangan PCR dalam diagnosis tuberkulosis

Saat ini, diagnostik semacam itu lebih jarang terjadi daripada keteraturan. Dan untuk ini ada alasannya.

1. Ini adalah metode penelitian yang mahal. Di banyak klinik, peralatan untuk PCR tidak ada karena biayanya yang tinggi, tetapi analisis masih dapat dilakukan di laboratorium berbayar.
2. Segera setelah perawatan, mikobakteri mati atau hidup dalam jumlah kecil mungkin masih ada dalam tubuh manusia (hasilnya akan positif selama diagnosa PCR), sehingga metode ini tidak dapat diandalkan saat ini, tidak masuk akal untuk melakukannya.
3. Mutasi mikobakteri menyebabkan PCR tidak efektif - urutan untai DNA normal tidak dapat disintesis.
4. Penting untuk memilih lingkungan yang tepat untuk penelitian, darah diambil hanya jika diduga terinfeksi (sepsis), tidak perlu mengambil dahak jika ada masalah tuberkulosis organ sistem saraf. Dalam hal ini, PCR tidak akan dapat mendeteksi patogen dan diagnosis tidak akan informatif.

Indikasi untuk mendeteksi TB menggunakan analisis PCR

Diagnosis PCR tuberkulosis dilakukan paling sering pada kasus kontroversial. Kapan dokter merujuk penelitian ini?

1. Jika sulit untuk membuat diagnosis menggunakan metode yang tersedia biasa, tetapi ada kontak dengan pasien dengan TBC.
2. Dalam kasus ketika seseorang tidak dapat dikirim ke klinik untuk menjalani tes rutin rutin untuk TB, lebih mudah untuk memeriksanya menggunakan PCR, karena dahak untuk tes dapat dikirim dalam toples dan diagnosa dikonfirmasi dalam beberapa jam.
3. Jika seseorang akan menjalani operasi darurat dan sangat mendesak untuk mengetahui apakah dia sakit TBC.
4. Jika perlu, seorang wanita hamil juga lebih baik untuk memeriksa TBC menggunakan PCR, karena metode ini aman.
5. Pada basis berbayar, siapa pun yang belum didiagnosis dengan TB telah dikonfirmasi menggunakan metode bakteriologis dan fluoroskopi. Hal ini terjadi ketika lesi di paru-paru tidak terlihat dalam gambar langsung, dan orang selama pengiriman dahak untuk penelitian tidak dapat mengikuti rekomendasi untuk pengumpulan bahan yang benar. Dalam hal ini, orang tersebut khawatir tentang semua gejala karakteristik TB paru.
6. Ketika ada keraguan tentang hasil tes Mantoux.
7. Lebih disukai untuk melakukan diagnosis PCR tuberkulosis pada anak-anak. Prosedur ini aman, tidak menciptakan paparan radiasi tambahan, dan efektif dalam mendeteksi bentuk penyakit yang sulit didiagnosis.

Diagnosis tuberkulosis yang tepat waktu adalah kunci untuk perawatan yang diresepkan dengan benar dan mengurangi penyebaran penyakit. Seringkali, metode deteksi penyakit yang sudah dikenal tidak selalu efektif. Oleh karena itu, PCR saat ini adalah salah satu cara yang paling dapat diandalkan dan aman untuk mendeteksi infeksi pada tahap awal perkembangannya.

Keuntungan dan kerugian PCR (a) untuk diagnosis tuberkulosis

Infeksi tuberkulosis spesifik telah terjadi pada jaringan dan struktur manusia selama bertahun-tahun, dan dalam keadaan tertentu menyebar cepat ke seluruh tubuh dalam 2-3 bulan. Kadang-kadang jalannya pengobatan terbaik sangat sulit untuk dipilih karena keterlambatan diagnosis dan adaptasi patogen pada banyak obat.

Diagnosis tuberkulosis PCR terbaru membantu mendeteksi tidak hanya penyakit yang berkembang, tetapi juga patogen itu sendiri, ketika tanda-tanda pertama penyakit belum muncul.

Apa itu PCR?

Diagnosis TBC oleh PCR telah muncul baru-baru ini. Pada tahun 1983, seorang ahli mikrobiologi dari Amerika, Cary Mullis, menemukan prosedur dimana mikroorganisme dapat direkonstruksi dari bahan biologis dalam segmen pendek. Karya ini telah mendapatkan Hadiah Nobel.

PCR untuk TBC adalah proses rantai polimer di mana diagnosis dan deteksi patogen virus oleh rekayasa genetika. Teknik ini digunakan di laboratorium imunologi, mikrobiologi, virologi dan biokimia.

Metode universal membantu dokter untuk mendiagnosis dan mengidentifikasi proses infeksi bahkan setelah jam pertama infeksi, jauh sebelum timbulnya gejala. Penelitian dimungkinkan bahkan dengan sejumlah kecil biomaterial.

Apa yang dibutuhkan untuk analisis?

• Beberapa segmen DNA (primer), yang dengannya sintesis biologis dimulai;
• Senyawa nukleotida, dasar molekul DNA atau RNA;
• Enzim polimerase yang mempercepat analisis PCR.

Apa dasar dari metode ini?

Pertama, suatu segmen DNA diekstraksi dari biomaterial dari orang yang terinfeksi, menggunakan metode biosintesis gen-molekuler, jenis mikroorganisme yang menjadi milik biofragmen ditentukan lebih lanjut.

Reaksi kompleks ini membutuhkan waktu lebih sedikit daripada beberapa biometode. PCR menentukan patogen dalam beberapa jam, sementara tidak perlu mengisolasinya dari cairan biologis (dahak, serebrospinal atau media darah), tidak perlu untuk menumbuhkannya dalam waktu lama pada media nutrisi. Sudah cukup bahwa bahan yang diteliti mengandung untai DNA dari patogen infeksius.

Ketika melakukan tes darah PCR untuk TBC secara in vitro, sintesis asam ribonukleat dari mycobacterium tuberculosis dibuat secara artifisial.

Tahapan diagnosis

Reaksi molekuler oleh PCR adalah prosedur sederhana yang membutuhkan sedikit waktu. Biomaterial yang diperlukan diambil: darah, dahak, cairan pencuci bronkial digunakan untuk menentukan tbc.

1. Pertama, bentuk utama DNA dihancurkan, 2 rantai dipisahkan pada suhu tinggi (maksimum 98 ° C tidak lebih dari 2 menit);
2. Kemudian dilakukan anil, suhu primer dikurangi beberapa divisi, untai DNA terhubung ke primer;
3. Tahap selanjutnya disebut elongasi, dengan biosintesis dari struktur molekul yang diperlukan.

Untuk mendapatkan jumlah salinan DNA yang diperlukan, dari 25 hingga 30 siklus seperti itu harus lewat, dan jumlah mikobakteri yang dihasilkan mudah dikenali.

Apakah perlu melakukan PCR untuk TBC?

Langsung ke semua pasien dengan dugaan TVC, diagnostik rantai tidak dilakukan, karena prosedur membutuhkan penggunaan peralatan yang mahal. Tidak semua institusi medis mengizinkannya untuk dibeli, terutama karena metode diagnosa mycobacterium tuberculosis yang biasa juga bersifat informatif.

• Pengambilan riwayat dengan cermat, menanyai pasien;
• Pemeriksaan eksternal;
• Tes tuberkulin Mantoux;
• Pemeriksaan radiografi atau fluorografi;
• Jika perlu, diagnostik komputer;
• Pemeriksaan mikroskopis atau bakteriologis dari topeng dengan dahak.

PCR untuk TBC dilakukan hanya ketika tidak memungkinkan untuk melakukan analisis instrumental lain atau dalam keadaan yang sulit untuk didiagnosis.

Terlepas dari kenyataan bahwa sejumlah besar metode diagnostik telah ditemukan, jumlah pasien dengan TB terus bertambah. Selain itu, kejadian tersebut telah memperoleh beberapa fitur: bentuk parah dari penyakit ini sering diamati, jumlah kematian meningkat, patogen menjadi resisten terhadap obat kemoterapi yang ada.

Banyak orang tidak ingin menjalani pemeriksaan rutin setiap tahun, menolak vaksinasi, yang mengarah pada peningkatan kejadian. Keadaan seperti itu membutuhkan metode penelitian yang efektif dan informatif yang tersedia untuk orang dewasa dan anak-anak yang didiagnosis dengan tbc. PCR memiliki keunggulan dibandingkan metode diagnostik lainnya.

Apa nilai metode ini?

Penelitian terbaru ini telah membuktikan dirinya dengan baik. Jika karena sejumlah alasan sulit untuk membuat diagnosis atau, dalam beberapa kasus kontroversial, PCR mendeteksi basil tuberkel lebih mudah dalam bahan biologis daripada metode lain.

• Penelitian cepat ini, segmen kecil molekul memungkinkan untuk membuat diagnosis yang akurat dalam waktu singkat dalam waktu sekitar 5 jam, ini digunakan dalam kasus darurat, misalnya, sebelum intervensi bedah yang mendesak;
• Tes darah untuk TBC dimungkinkan ketika metode lain tidak tersedia atau kontraindikasi - kadang-kadang untuk mendeteksi patogen tbc, banyak Rg-shot harus diambil, dosis radiasi terlalu besar;
• Menggunakan reaksi polimerase, cairan biologis apa pun dapat diperiksa keberadaan mikobakteri. Misalnya, Anda dapat melakukan studi tentang cairan serebrospinal dengan meningitis tuberkulosis atau urin dengan tuberkulosis urogenital;
• Metode ini aman, diagnosis TBC pada anak-anak menggunakan PCR tidak menyebabkan kesulitan;
• Metode reaksi polimer menunjukkan basil tuberkel dalam bentuk dan tahapan penyakit apa pun;
• Kehadiran hanya beberapa bakteri dalam biomaterial memungkinkan Anda untuk melihat keberadaan mikroorganisme, karena ini adalah reaksi sensitif;
• PCR dengan mudah mendiagnosis kambuhnya penyakit.

Terlepas dari sejumlah besar keuntungan, semua pasien dengan dugaan studi tbc tidak dilakukan, karena ada juga kelemahannya, mereka juga diperhitungkan.

Video

Video - diagnosis dini

Apa kerugiannya?

Metode diagnosis ini agak luar biasa daripada yang alami, karena ini ada alasan. Pertama-tama, tingginya biaya metode diperhitungkan. Peralatan itu mahal, klinik umum tidak memiliki kesempatan untuk membelinya karena harganya yang tinggi, tetapi sebagian besar laboratorium yang dibayar memiliki peralatan itu, mereka dianalisis.

• Metode ini mendeteksi bakteri mati yang telah mati setelah perawatan, sementara PCR menunjukkan hasil positif. Segera setelah kemoterapi, tidak masuk akal untuk melakukan penelitian, karena hasilnya tidak dapat diandalkan;
• Mutasi Mycobacterium tuberculosis rentan, yang mengarah pada inefisiensi metode, dan untai DNA tidak dapat disintesis secara konsisten.

Lingkungan untuk penelitian harus dipilih dengan hati-hati, darah atau urin hanya dapat dikumpulkan jika ada kecurigaan infeksi. Sputum tidak boleh diambil untuk pemeriksaan jika diduga TB tulang. Dalam situasi ini, diagnosa akan salah.

Darah dan urin dari seorang pasien dengan tuberculosis untuk dipelajari pada PCR jarang diambil, identifikasi penyakit dengan cara ini dipertanyakan. Dalam media biologis ini, patogen ditentukan hanya pada sepsis, atau dalam kasus TB yang disebarluaskan. Bentuk lokal paling umum, dengan darah dan urin mereka tetap tidak berubah. Paling sering, dahak diambil untuk pemeriksaan.

Siapa yang menunjukkan analisisnya?

Sebagian besar pasien dikirim untuk diagnosis PCR dalam kasus TB yang kontroversial dan sulit. Kapan profesional medis mengeluarkan rujukan untuk penelitian?

1. Jika ada kontak dengan seseorang yang telah didiagnosis dengan tuberkulosis dengan andal, tetapi sulit untuk didiagnosis menggunakan metode konvensional;
2. Dalam keadaan itu, jika pasien menyediakan klinik tidak mungkin dilakukan radiografi atau penelitian lain. Dalam situasi seperti itu, lebih mudah untuk memeriksanya menggunakan metode polimer. Analisis dahak dikirim ke laboratorium dalam wadah khusus, dan hasilnya baru diketahui setelah beberapa jam;
3. Sebelum operasi, sangat penting untuk menentukan apakah pasien sakit dengan TBC, dalam hal ini PCR diindikasikan;
4. Karena keamanan metode ini, dimungkinkan untuk melakukan survei terhadap wanita hamil atau anak-anak, tanpa membuat beban x-ray tambahan;
5. Hasil tes Mantoux Diragukan.

Siapa pun yang ingin dapat menjalani pemeriksaan untuk biaya, jika TBC belum dikonfirmasi dengan bantuan bakteriologi dan fluoroskopi. Ini terjadi jika lesi di jaringan paru-paru tidak terlihat dalam gambar Rg dalam proyeksi langsung, dan pasien tidak dapat mengumpulkan dahak dengan benar, tetapi tanda-tanda tuberkulosis manusia terganggu.

Reaksi PCR modern untuk diagnosis adalah kunci keberhasilan pengobatan, akibatnya prevalensi penyakit menurun. Metode tradisional untuk mengidentifikasi penyakit tidak selalu menghasilkan efek yang diinginkan.

Jadi analisis PCR sampai saat ini telah menjadi salah satu metode diagnosis yang dapat diandalkan dan aman pada tahap awal penyakit.