Keuntungan dan kerugian PCR (a) untuk diagnosis tuberkulosis

Infeksi tuberkulosis spesifik telah terjadi pada jaringan dan struktur manusia selama bertahun-tahun, dan dalam keadaan tertentu menyebar cepat ke seluruh tubuh dalam 2-3 bulan. Kadang-kadang jalannya pengobatan terbaik sangat sulit untuk dipilih karena keterlambatan diagnosis dan adaptasi patogen pada banyak obat.

Diagnosis tuberkulosis PCR terbaru membantu mendeteksi tidak hanya penyakit yang berkembang, tetapi juga patogen itu sendiri, ketika tanda-tanda pertama penyakit belum muncul.

Apa itu PCR?

Diagnosis TBC oleh PCR telah muncul baru-baru ini. Pada tahun 1983, seorang ahli mikrobiologi dari Amerika, Cary Mullis, menemukan prosedur dimana mikroorganisme dapat direkonstruksi dari bahan biologis dalam segmen pendek. Karya ini telah mendapatkan Hadiah Nobel.

PCR untuk TBC adalah proses rantai polimer di mana diagnosis dan deteksi patogen virus oleh rekayasa genetika. Teknik ini digunakan di laboratorium imunologi, mikrobiologi, virologi dan biokimia.

Metode universal membantu dokter untuk mendiagnosis dan mengidentifikasi proses infeksi bahkan setelah jam pertama infeksi, jauh sebelum timbulnya gejala. Penelitian dimungkinkan bahkan dengan sejumlah kecil biomaterial.

Apa yang dibutuhkan untuk analisis?

• Beberapa segmen DNA (primer), yang dengannya sintesis biologis dimulai;
• Senyawa nukleotida, dasar molekul DNA atau RNA;
• Enzim polimerase yang mempercepat analisis PCR.

Apa dasar dari metode ini?

Pertama, suatu segmen DNA diekstraksi dari biomaterial dari orang yang terinfeksi, menggunakan metode biosintesis gen-molekuler, jenis mikroorganisme yang menjadi milik biofragmen ditentukan lebih lanjut.

Reaksi kompleks ini membutuhkan waktu lebih sedikit daripada beberapa biometode. PCR menentukan patogen dalam beberapa jam, sementara tidak perlu mengisolasinya dari cairan biologis (dahak, serebrospinal atau media darah), tidak perlu untuk menumbuhkannya dalam waktu lama pada media nutrisi. Sudah cukup bahwa bahan yang diteliti mengandung untai DNA dari patogen infeksius.

Ketika melakukan tes darah PCR untuk TBC secara in vitro, sintesis asam ribonukleat dari mycobacterium tuberculosis dibuat secara artifisial.

Tahapan diagnosis

Reaksi molekuler oleh PCR adalah prosedur sederhana yang membutuhkan sedikit waktu. Biomaterial yang diperlukan diambil: darah, dahak, cairan pencuci bronkial digunakan untuk menentukan tbc.

1. Pertama, bentuk utama DNA dihancurkan, 2 rantai dipisahkan pada suhu tinggi (maksimum 98 ° C tidak lebih dari 2 menit);
2. Kemudian dilakukan anil, suhu primer dikurangi beberapa divisi, untai DNA terhubung ke primer;
3. Tahap selanjutnya disebut elongasi, dengan biosintesis dari struktur molekul yang diperlukan.

Untuk mendapatkan jumlah salinan DNA yang diperlukan, dari 25 hingga 30 siklus seperti itu harus lewat, dan jumlah mikobakteri yang dihasilkan mudah dikenali.

Apakah perlu melakukan PCR untuk TBC?

Langsung ke semua pasien dengan dugaan TVC, diagnostik rantai tidak dilakukan, karena prosedur membutuhkan penggunaan peralatan yang mahal. Tidak semua institusi medis mengizinkannya untuk dibeli, terutama karena metode diagnosa mycobacterium tuberculosis yang biasa juga bersifat informatif.

• Pengambilan riwayat dengan cermat, menanyai pasien;
• Pemeriksaan eksternal;
• Tes tuberkulin Mantoux;
• Pemeriksaan radiografi atau fluorografi;
• Jika perlu, diagnostik komputer;
• Pemeriksaan mikroskopis atau bakteriologis dari topeng dengan dahak.

PCR untuk TBC dilakukan hanya ketika tidak memungkinkan untuk melakukan analisis instrumental lain atau dalam keadaan yang sulit untuk didiagnosis.

Terlepas dari kenyataan bahwa sejumlah besar metode diagnostik telah ditemukan, jumlah pasien dengan TB terus bertambah. Selain itu, kejadian tersebut telah memperoleh beberapa fitur: bentuk parah dari penyakit ini sering diamati, jumlah kematian meningkat, patogen menjadi resisten terhadap obat kemoterapi yang ada.

Banyak orang tidak ingin menjalani pemeriksaan rutin setiap tahun, menolak vaksinasi, yang mengarah pada peningkatan kejadian. Keadaan seperti itu membutuhkan metode penelitian yang efektif dan informatif yang tersedia untuk orang dewasa dan anak-anak yang didiagnosis dengan tbc. PCR memiliki keunggulan dibandingkan metode diagnostik lainnya.

Apa nilai metode ini?

Penelitian terbaru ini telah membuktikan dirinya dengan baik. Jika karena sejumlah alasan sulit untuk membuat diagnosis atau, dalam beberapa kasus kontroversial, PCR mendeteksi basil tuberkel lebih mudah dalam bahan biologis daripada metode lain.

• Penelitian cepat ini, segmen kecil molekul memungkinkan untuk membuat diagnosis yang akurat dalam waktu singkat dalam waktu sekitar 5 jam, ini digunakan dalam kasus darurat, misalnya, sebelum intervensi bedah yang mendesak;
• Tes darah untuk TBC dimungkinkan ketika metode lain tidak tersedia atau kontraindikasi - kadang-kadang untuk mendeteksi patogen tbc, banyak Rg-shot harus diambil, dosis radiasi terlalu besar;
• Menggunakan reaksi polimerase, cairan biologis apa pun dapat diperiksa keberadaan mikobakteri. Misalnya, Anda dapat melakukan studi tentang cairan serebrospinal dengan meningitis tuberkulosis atau urin dengan tuberkulosis urogenital;
• Metode ini aman, diagnosis TBC pada anak-anak menggunakan PCR tidak menyebabkan kesulitan;
• Metode reaksi polimer menunjukkan basil tuberkel dalam bentuk dan tahapan penyakit apa pun;
• Kehadiran hanya beberapa bakteri dalam biomaterial memungkinkan Anda untuk melihat keberadaan mikroorganisme, karena ini adalah reaksi sensitif;
• PCR dengan mudah mendiagnosis kambuhnya penyakit.

Terlepas dari sejumlah besar keuntungan, semua pasien dengan dugaan studi tbc tidak dilakukan, karena ada juga kelemahannya, mereka juga diperhitungkan.

Video

Video - diagnosis dini

Apa kerugiannya?

Metode diagnosis ini agak luar biasa daripada yang alami, karena ini ada alasan. Pertama-tama, tingginya biaya metode diperhitungkan. Peralatan itu mahal, klinik umum tidak memiliki kesempatan untuk membelinya karena harganya yang tinggi, tetapi sebagian besar laboratorium yang dibayar memiliki peralatan itu, mereka dianalisis.

• Metode ini mendeteksi bakteri mati yang telah mati setelah perawatan, sementara PCR menunjukkan hasil positif. Segera setelah kemoterapi, tidak masuk akal untuk melakukan penelitian, karena hasilnya tidak dapat diandalkan;
• Mutasi Mycobacterium tuberculosis rentan, yang mengarah pada inefisiensi metode, dan untai DNA tidak dapat disintesis secara konsisten.

Lingkungan untuk penelitian harus dipilih dengan hati-hati, darah atau urin hanya dapat dikumpulkan jika ada kecurigaan infeksi. Sputum tidak boleh diambil untuk pemeriksaan jika diduga TB tulang. Dalam situasi ini, diagnosa akan salah.

Darah dan urin dari seorang pasien dengan tuberculosis untuk dipelajari pada PCR jarang diambil, identifikasi penyakit dengan cara ini dipertanyakan. Dalam media biologis ini, patogen ditentukan hanya pada sepsis, atau dalam kasus TB yang disebarluaskan. Bentuk lokal paling umum, dengan darah dan urin mereka tetap tidak berubah. Paling sering, dahak diambil untuk pemeriksaan.

Siapa yang menunjukkan analisisnya?

Sebagian besar pasien dikirim untuk diagnosis PCR dalam kasus TB yang kontroversial dan sulit. Kapan profesional medis mengeluarkan rujukan untuk penelitian?

1. Jika ada kontak dengan seseorang yang telah didiagnosis dengan tuberkulosis dengan andal, tetapi sulit untuk didiagnosis menggunakan metode konvensional;
2. Dalam keadaan itu, jika pasien menyediakan klinik tidak mungkin dilakukan radiografi atau penelitian lain. Dalam situasi seperti itu, lebih mudah untuk memeriksanya menggunakan metode polimer. Analisis dahak dikirim ke laboratorium dalam wadah khusus, dan hasilnya baru diketahui setelah beberapa jam;
3. Sebelum operasi, sangat penting untuk menentukan apakah pasien sakit dengan TBC, dalam hal ini PCR diindikasikan;
4. Karena keamanan metode ini, dimungkinkan untuk melakukan survei terhadap wanita hamil atau anak-anak, tanpa membuat beban x-ray tambahan;
5. Hasil tes Mantoux Diragukan.

Siapa pun yang ingin dapat menjalani pemeriksaan untuk biaya, jika TBC belum dikonfirmasi dengan bantuan bakteriologi dan fluoroskopi. Ini terjadi jika lesi di jaringan paru-paru tidak terlihat dalam gambar Rg dalam proyeksi langsung, dan pasien tidak dapat mengumpulkan dahak dengan benar, tetapi tanda-tanda tuberkulosis manusia terganggu.

Reaksi PCR modern untuk diagnosis adalah kunci keberhasilan pengobatan, akibatnya prevalensi penyakit menurun. Metode tradisional untuk mengidentifikasi penyakit tidak selalu menghasilkan efek yang diinginkan.

Jadi analisis PCR sampai saat ini telah menjadi salah satu metode diagnosis yang dapat diandalkan dan aman pada tahap awal penyakit.

Analisis PCR untuk TBC

Analisis PCR untuk TBC adalah yang paling populer di antara penelitian medis di bidang penyakit ini.

Tapi bagaimana cara memperingatkan diri sendiri dan orang yang Anda cintai dari penyakit mengerikan ini? Bagaimana cara lulus tes yang diperlukan untuk PCR?

Gejala TBC dan pencegahannya

Para ahli mengatakan bahwa sekitar 30% dari total populasi menderita TBC.

Persentase tertinggi penyakit ini dikembangkan di negara-negara yang belum berkembang. Ini paling sering terjadi sebagai akibat berkurangnya kekebalan pada manusia.

Penyakit ini adalah salah satu yang tertua. Penyakit ini dapat ditemukan di lapisan otak, di saluran pencernaan, di sendi dan tulang belakang, di sistem kemih dan di area kecil di kulit manusia.

Para ahli paling mudah menentukan kulit yang terkena. Di situs ada segel kecil, yang seiring waktu ukurannya bertambah, pecah dengan cairan keputihan.

Agen penyebab TBC paling sering dapat diambil ketika berbicara dengan orang yang sakit, ketika mereka batuk atau bersin. Biasanya, penyakit ini berlanjut tanpa gejala atau memiliki bentuk terbuka, tetapi diagnosis PCR tentang tuberkulosis memungkinkannya untuk dideteksi pada tahap awal dan dalam kasus darurat.

Gejala penyakit: batuk basah berkepanjangan, demam, menggigil, berkeringat berlebihan di malam hari, penurunan berat badan yang tajam, perasaan lelah dan lemah.

Bentuk terbuka dari penyakit ini adalah yang paling berbahaya. Seseorang yang menderita TBC dapat menginfeksi orang sehat.

Gejala terpenting penyakit paru adalah hemoptisis. Itu terjadi dalam segala bentuk penyakit.

Dalam beberapa situasi, ini dapat menyebabkan pendarahan dari paru-paru seseorang. Ini sangat berbahaya dan membutuhkan intervensi medis yang mendesak.

Untuk pencegahan dan pengenalan TBC, para ahli meresepkan: sampel - tes TBC, pemeriksaan bahan biologis, fluorografi, sinar-X dan tes darah, dahak atau air liur.

Diagnosis penyakit

Diagnosis penyakit yang diperbaiki - ini adalah benar dan selama perawatan dimulai. Dalam kebanyakan kasus, metode yang biasa untuk mendeteksi patogen tidak selalu memiliki efek dan sudah usang.

Cara paling penting untuk mengidentifikasi dan mendiagnosis penyakit paru adalah tes pemeriksaan medis. Biasanya menggunakan diagnostik PCR. Survei ini ditemukan baru-baru ini, pada tahun 1983, oleh ahli biokimia Amerika, Mullis.

Tes pada pasien dengan tuberkulosis paru dilakukan secara eksklusif dalam kasus-kasus khusus ketika sulit untuk menegakkan diagnosis atau tidak mungkin untuk mendeteksi penyakit dengan cara instrumental.

Reaksi berantai polimerase adalah metode PCR yang andal. Analisis ini memungkinkan untuk menentukan agen penyebab berapa banyak dalam darah, urin dan cairan sumsum tulang belakang. Pemeriksaan medis semacam itu adalah yang paling aman.

Analisis PCR memberikan hasil 100%.

Ini memiliki sensitivitas tinggi, yang membantu mengenali penyakit untuk pertama kalinya setelah infeksi, sebelum gejala penyakit muncul. Metode analisis ini memberikan hasil dalam beberapa jam setelah pengiriman bahan biologis. Penaburan analisis ini dilakukan tiga kali, tetapi aspirasi perut yang sakit hanya dilakukan di rumah sakit.

Tiga kriteria dikembangkan untuk menentukan hasil: akurasi tinggi, sensitivitas hingga 90%, spesifisitas.

Tes untuk PCR digunakan dalam beberapa kasus:

1. untuk mendiagnosis TB paru;
2. menentukan sumber penyakit;
3. definisi lokalisasi ekstrapulmoner;
4. diagnosis kekambuhan.

Mengevaluasi hasilnya, dan meresepkan perawatan medis yang benar, hanya dapat spesialis. Sangat penting untuk menetapkan skema perawatan medis yang benar untuk mendeteksi TB, perlu melakukan tes untuk kerentanan patogen terhadap perangkat anti-TB.

Berbagai tes kesehatan TBC

Anda dapat mengambil analisis yang diperlukan dalam dua cara: mengambil darah atau air liur dari seseorang atau mengambil dahak.

Tes darah oleh PCR dapat dari dua jenis: ELISA dan PCR. Studi semacam itu membantu memantau keefektifan perawatan medis.

ELISA membantu menemukan antibodi dalam tubuh manusia yang melawan mikroba TBC. Penelitian ini dilakukan sekali sehari. Kerugian utama adalah sensitivitasnya yang rendah, yang memungkinkan untuk menentukan hanya penyakit dengan tingkat infeksi yang rendah.

Penelitian yang paling populer dan efektif adalah analisis pada mycobacterium tuberculosis. Dengannya, dokter dapat dengan mudah menemukan DNA bakteri dalam darah manusia. Metode ini juga digunakan untuk menentukan jumlah bakteri, untuk mengontrol perawatan pasien, untuk mendeteksi kekambuhan dini.

Air liur PCR adalah salah satu metode penelitian paling maju. Analisis semacam itu akan membantu mengidentifikasi bakteri menular dalam saliva. Menggunakan PCR meningkatkan jumlah fragmen DNA dari mikroba berbahaya.

Metode kultur dimaksudkan untuk pemeriksaan sputum manusia, untuk mendeteksi mikrobakteri.

Mempersiapkan pengujian PCR

Perhatian, Anda membutuhkan persiapan air liur yang benar untuk PCR. Jika semua resep tidak diikuti, analisis mungkin positif palsu.

Sebelum mengikuti tes, dilarang merokok, minum makanan dan obat-obatan, serta mengonsumsi alkohol selama 12 jam. Dilarang menyikat gigi, Anda tidak bisa menggunakan alat pembilas, penyegar mulut dan benang gigi.

Dilarang menggunakan lipstik dan memasuki hubungan intim. Diizinkan membilas mulut Anda dengan air matang biasa;

Pemeriksaan ini akan membantu mengidentifikasi: herpes, klamidia, tuberkulosis, patogen pneumonia, oncovirus, barolleosis, mononukleosis, HIV, hepatitis dari semua jenis, rubella.

Analisis untuk mikobakteri terutama dilakukan dalam kasus kontroversial, yaitu jika sulit untuk membuat diagnosis atau ada kontak dengan pasien dengan TBC, sebelum memulai operasi, untuk mendeteksi penyakit. Digunakan untuk pemeriksaan wanita hamil, karena metode ini paling aman untuk ibu dan janin.

Kadang-kadang analisis dilakukan di klinik swasta, karena pasien tidak mematuhi aturan untuk pengujian, tetapi pada saat yang sama dia khawatir tentang semua gejalanya. Analisis dapat dilakukan ketika spesialis tidak yakin setelah melakukan tes Mantoux atau pasien adalah anak-anak.

Keuntungan dan kerugian dari tes medis untuk penentuan TBC

PCR adalah cara paling populer dan efektif untuk menentukan penyakit.

Perbedaan terbesar dari penelitian lain adalah hasil yang cepat dan akurat.

Keuntungan dari pemeriksaan medis ini adalah dapat dilakukan untuk penelitian urologis, ginekologi, onkologis, infeksi, hematologi, paru, gastroenterologis dan lainnya.

Keuntungan utama dari studi medis tersebut adalah bahwa tes darah, dahak dan air liur siap dalam waktu singkat (akan membutuhkan 5 jam untuk mendeteksi penyakit). Pemeriksaan medis semacam itu memungkinkan dilakukannya tes ketika metode tertentu mempelajari suatu penyakit dilarang atau tidak dapat diakses. Bagus untuk mendeteksi kekambuhan pada manusia.

Berkat analisis ini, menjadi mungkin untuk melakukan penelitian untuk lingkungan biologis apa pun. Itu diperbolehkan untuk mengambil materi dari anak-anak. PCR memungkinkan untuk mengidentifikasi agen penyebab pada setiap tahap penyakit. Karena sensitivitasnya yang tinggi, mikroba dapat ditemukan walaupun hanya sedikit bakteri yang ada.

Metode PCR memperluas kemampuannya. Ini juga digunakan untuk menentukan ayah, untuk pembuatan gen baru, mutasi, untuk melintasi elemen DNA, dan sebagainya.

Kerugian dari penelitian ini adalah metode survei yang mahal.

Setelah perawatan medis, tes darah dapat menunjukkan adanya patogen hidup atau mati dalam jumlah kecil, setelah pemeriksaan medis, itu akan memberikan hasil positif.

Bakteri dan mikroba dapat mengalami mutasi, setelah itu PCR tidak akan dapat mengidentifikasi dan mengidentifikasi mereka, oleh karena itu, hanya seorang spesialis yang dapat meresepkan studi tentang lingkungan yang diperlukan, jika tidak, pemeriksaan medis semacam itu tidak akan efektif.

Setelah pengujian, ada hasil negatif, tetapi ini tidak mengecualikan kemungkinan seseorang terinfeksi TBC. Pemeriksaan medis semacam itu dilakukan untuk pasien dengan penyakit paru-paru yang parah, ketika studi lain tidak memberikan hasil yang akurat. PCR akan bermanfaat bagi penderita TB paru dan luar paru.

Sayangnya, peralatan medis untuk mendeteksi patogen tuberkulosis sangat mahal.

Rumah sakit umum dan klinik tidak mampu, tetapi klinik berbayar mengambil tes pasien dan memberikan hasil yang siap pakai dalam waktu singkat.

Diagnosis PCR tuberkulosis pada anak-anak dan orang dewasa

Metode diagnostik modern (pcr, diaskintest, tes kuantiferon) sangat efektif, tetapi dalam praktiknya studi belum diverifikasi. Diagnosis tuberkulin adalah dasar untuk mengidentifikasi orang yang terinfeksi dan sakit.

Metode ini memungkinkan untuk mengidentifikasi banyak orang sakit, mengurangi statistik morbiditas, mortalitas.

Menabur mikobakteri dan mikroskopi dahak menurut Zill-Nelson memungkinkan Anda mendiagnosis infeksi dengan andal. Masalahnya menyebabkan pengambilan dahak secara langsung dari bronkus yang terkena. Pada latar belakang proses tuberkulosis, bagian penting dari pohon bronkial terpengaruh. Setelah penyemaian bakteri, dimungkinkan untuk melakukan tes untuk sensitivitas patogen terhadap antibiotik.

Setelah menganalisis hasil diagnostik oleh ahli phthisiatricians, menjadi jelas bahwa kurangnya ekskresi tongkat Koch tidak berarti tidak adanya infeksi dalam tubuh. Agen penyebab dapat ditentukan setelah bahan pengambilan kedua, ketiga, keempat.

Metode diagnostik modern (dst, tes Quantiferon) mendeteksi mikobakteri dengan perjalanan penyakit yang aktif. Di hadapan mikobakteri di dalam kelenjar getah bening, dengan bentuk luar paru penyakit, tes yang paling sering negatif.

Diagnosis yang tepat waktu adalah dasar untuk mencegah komplikasi serius dan konsekuensi berbahaya dari penyakit ini.

Metode modern

Penggantian diagnosis TB klasik adalah diaskintest (dst). Menurut peraturan terbaru, penelitian ini harus menggantikan tes Mantoux standar, yang memungkinkan untuk mengidentifikasi banyak kasus morbiditas dan infeksi di antara populasi.

Esensi Diaskintest, serta diagnosis tuberkulin, melibatkan pemberian protein patogen tuberkulosis secara subkutan. Menanggapi injeksi, reaksi hipersensitivitas dikembangkan dengan perubahan kulit spesifik: kemerahan, indurasi, lepuh.

Hasil positif Diaskintest adalah tipikal untuk pasien dengan perjalanan penyakit aktif. Dalam kasus infeksi atau peningkatan alergi, penelitian ini akan menjadi negatif. Efek negatif dst bisa menjadi hasil dari kekebalan yang kuat, tetapi ketika seseorang terinfeksi.

Jika dibandingkan dengan Mantu, Diaskintest adalah cara yang lebih fleksibel dan sensitif untuk mendiagnosis TB. Tidak adanya deteksi infeksi memerlukan penggunaannya bersamaan dengan diagnosis TB.

Terlepas dari hasil uji klinis pertama, para ilmuwan berdebat tentang universalitas umum dan sensitivitas metode ini, penelitian ini tidak dapat dianggap sebagai solusi diagnostik universal.

Sebuah tes telah dikembangkan oleh akademisi dari Sechenov Research Institute. Tidak adanya alergi saat menggunakan diaskintest dijelaskan oleh pemberian subkutan protein TBC spesifik spesies. Setelah pengenalan mereka ditentukan oleh reaksi kulit dalam bentuk kemerahan, segel.

Apa itu tes kuantiferon

Tes kuantiferon dievaluasi setelah mengambil darah pasien. Mekanisme prosedurnya adalah menentukan gamma-interferon, yang dilepaskan oleh limfosit-T setelah bertemu dengan mycobacteria tuberculosis. Tes menentukan protein TBC yang tidak hanya mengandung bakteri manusia dan sapi. Tes kuantiferon juga dapat digunakan untuk mendiagnosis mikobakteriosis yang disebabkan oleh mikobakteri lain, yang membentuk perubahan spesifik pada sinar-X. Hasil tes ditentukan dalam beberapa tabung reaksi, yang meningkatkan sensitivitas diagnostik metode ini.

PCR untuk diagnosis tuberkulosis anak

Reaksi rantai polimerase adalah metode yang akurat tetapi mahal untuk mendiagnosis TB. PCR dilakukan setelah bronkoskopi.

Adalah rasional untuk melakukan reaksi berantai polimerase setelah menerima hasil negatif. Hasil dievaluasi setelah kultur sputum tiga kali Mycobacterium tuberculosis. Di bawah kondisi yang paling menguntungkan, identifikasi patogen mengindikasikan infeksi. Tujuan chemoprophylaxis menghindari proses TB aktif di hadapan tongkat Koch.

Setelah menerima strain mikroorganisme, penyemaian pada kerentanan antibiotik dimungkinkan. Penentuan antibiotik yang dapat membunuh mikroorganisme, memungkinkan kita untuk mengevaluasi obat mana yang mengobati infeksi.

PCR pada anak-anak dilakukan dengan hasil negatif pembenihan, tetapi jika ada giliran tes tuberkulin, visualisasi tanda-tanda infeksi sinar-X, deteksi gejala klinis infeksi saat ini.

Reaksi rantai polimerase memberikan akurasi tinggi (sekitar 99%). Metode ini didasarkan pada amplifikasi asam nukleat. Mycobacteria, virus dan mikroorganisme lainnya memiliki urutan nukleotida yang unik. Diagnosis mereka memungkinkan untuk mengidentifikasi agen penyebab penyakit.

Sensitivitas PCR pada anak-anak lebih rendah daripada orang dewasa. Dalam prakteknya, fitur berikut dari reaksi berantai polimerase pada anak terungkap:

1. Spesifisitas - 80-100%;
2. Sensitivitas - 25-80%.

Meskipun akurasi metode ini tinggi, mendapatkan hasil negatif tidak berarti tidak adanya TB pada anak-anak. Penggunaan metode yang lebih rasional pada pasien dengan keadaan defisiensi imun. Dalam diagnosis infeksi TBC ekstrapulmoner.

Kesalahan interpretasi ditentukan oleh pelanggaran dalam pengumpulan dan persiapan bahan untuk penelitian.

Alasan untuk hasil negatif PCR dalam diagnosis TBC

Penyebaran mikobakteri dalam tubuh oleh limfogen (melalui pembuluh limfatik) dan hematogen (melalui aliran darah) memastikan kolonisasi banyak jaringan, penampakan fokus infeksi di luar paru.

Ketika penentuan sinar-X fokus kerusakan (destruksi) di paru-paru tidak perlu untuk PCR. Pada orang dewasa, menggunakan radiografi, dimungkinkan untuk mengidentifikasi bentuk-bentuk lanjut dengan tingkat kepercayaan yang tinggi.

Pada anak-anak, studi PCR lebih sering digunakan karena lokalisasi laten mikobakteri di dalam kelenjar getah bening, yang mengarah ke hasil negatif ketika menggunakan metode diagnostik lainnya. Dengan kultur bakteri, cukup untuk mendeteksi sekitar 10 mikroorganisme. Harus diingat bahwa tidak semua orang bertanggung jawab atas TB paru aktif.

Untuk diagnosis PCR yang benar, pembibitan bakteri, DST, persyaratan harus diikuti:

1. Simpan bahan dalam tabung steril;
2. Hilangkan masuknya bakteri lain;
3. Saat mengangkut, amati kebersihan pribadi untuk mencegah biomaterial jatuh di tubuh, wajah, dan saluran udara.

Darah yang disimpan bersama dengan EDTA pengawet. Ada fitur unik dari persiapan bahan untuk masing-masing analisis laboratorium, yang sudah dikenal oleh para ahli.

Metode diagnostik yang inovatif

Deteksi dini infeksi memungkinkan kemoprofilaksis tepat waktu, untuk mencegah penyakit parah.

Penghapusan klinik di masa kanak-kanak, hasil tes tidak mencukupi, interpretasi buta huruf dari evaluasi sampel tidak memungkinkan verifikasi infeksi yang tepat waktu. Untuk mencegah morbiditas bayi, diperlukan analisis yang cermat, dengan kemungkinan menegakkan diagnosis pada tahap awal.

Metode modern diagnosis laboratorium TB pada anak-anak - deteksi TAB-TM

Reaksi terhadap penentuan penanda sel-T pada anak-anak yang disebut "TAB-TM" ditandai dengan sensitivitas tinggi. Esensi dari metode ini terdiri dari identifikasi gugus diferensiasi tertentu (CD-27) yang terlokalisasi pada permukaan T-limfosit. Setelah mengisolasi faktor ini, sitokin diwarnai dengan sitometri.

Metode ini telah dijelaskan dalam literatur sejak 2014. Hasil pengamatan menunjukkan sensitivitas metode yang tinggi. Penentuan TAB-TM adalah metode cepat untuk mendiagnosis TB dengan pemeriksaan dahak.

Tes darah untuk TBC - yang menunjukkan

Pada tahap awal, infeksi TBC terjadi tanpa gejala klinis spesifik. Diagnosis laboratorium pada anak-anak menjadi mungkin ketika tongkat Koch berkembang biak.

Sel apa yang dievaluasi dalam proses TB dalam tes darah laboratorium:

1. Sel darah merah adalah sel darah merah yang bertanggung jawab untuk mengangkut oksigen ke jaringan. Dengan perjalanan ringan TB paru dari sisi darah merah, tidak ada perubahan patologis. Kehadiran fokus destruktif berkontribusi terhadap perdarahan dengan anemia darah. Kondisi ini berkembang dengan radang tuberkulosis pada dinding usus. Jumlah retikulosit pada latar belakang patologi meningkat lebih dari 1%;
2. Leukosit meningkat dengan infeksi apa pun. Leukositosis disertai dengan pergeseran leukogram ke kiri. Peningkatan jumlah neutrofil tersegmentasi dapat ditelusuri pada tahap awal. Pada tuberkulosis berat dengan fusi purulen, keadaan defisiensi imun, leukopenia diamati (penurunan jumlah leukosit darah). Pada saat yang sama meningkatkan kandungan limfosit (lebih dari 20%);
3. Eosinofilia dapat ditelusuri ke tahap awal. Kondisi ini terjadi ketika infiltrat tuberkulosis dari berbagai organ. TBC parah dengan pembusukan pada orang dewasa menyebabkan tidak adanya eosinofil;
4. Peningkatan basofil.

Tes laboratorium untuk TBC tidak spesifik untuk anak-anak atau orang dewasa. Perubahan seperti itu adalah karakteristik dari banyak infeksi bakteri atau virus.

Indikator hemogram memberikan minat kepada spesialis TB untuk menentukan stadium infeksi TB.

Dengan infiltrasi aktif, leukositosis dapat ditelusuri karena peningkatan jumlah neutrofil. Grit patologis muncul dalam sel, yang menunjukkan keracunan darah.

Pusat-pusat disintegrasi menyebabkan penurunan jumlah eosinofil, neutrofil, bentuk muda, limfosit. Ketika diseminasi terjadi, monositosis absolut terjadi. Pada latar belakang resorpsi, jumlah limfosit dan eosinofil meningkat.

Pada konsolidasi pusat, hemogram tidak ditandai dengan perubahan.

Tes anak untuk TBC: diagnosis TBC

Untuk waktu yang lama, phthisiatricians menggelar reaksi Mantoux. Tes-tes untuk TBC semacam itu memungkinkan untuk mendeteksi tidak hanya infeksi aktif, tetapi juga infeksi. Esensi dari sampel adalah suntikan tuberkulin subkutan - suatu zat yang menyebabkan alergi pada tubuh. Bahan adonan yang digunakan diperoleh dari Micobacterium Bovis. Setelah injeksi subkutan, papula diperoleh, yang mencerminkan respons tubuh terhadap penetrasi mikobakteri:

1. Papula normal - ukuran dari 5 hingga 16 mm;
2. Dengan tidak adanya reaksi - melemahnya sistem kekebalan tubuh, tidak adanya mikobakteri;
3. Papula besar - adanya antigen bakteri, kontak dengan pembawa basil tuberkel.

Metode ini tidak dapat diandalkan karena banyaknya reaksi positif palsu. Ketika hasil yang dipertanyakan diperlukan konfirmasi PCR. Dengan munculnya diaskintest (dst), situasinya telah berubah. Kombinasi penggunaan metode memungkinkan untuk mendapatkan hasil yang lebih andal.

Metode klasik "phisiologis" untuk mendiagnosis TB

Ahli phytisiatri untuk diagnosis TB pada anak-anak dan orang dewasa menggunakan tes berikut:

• Studi tentang riwayat pasien (kontak dengan pasien atau pembawa tubercle bacillus). Mengidentifikasi faktor risiko sosial membantu menyarankan kemungkinan infeksi;
• Penilaian sensitivitas tuberculin (tes Mantoux) dengan PPD tuberculin dengan dosis 5-10 TE. Evaluasi hasil dilakukan dalam 48-72 jam;
• Pemeriksaan X-ray dilakukan pada anak-anak dan orang dewasa dengan dugaan tuberkulosis, suatu tikungan dari tes tuberkulin;
• Kultur bakteriologis adalah bukti infeksi yang tak terbantahkan yang disebabkan oleh Mycobacterium tuberculosis. Dengan pengumpulan dahak yang tepat, deteksi patogen dalam pencucian lambung, tes untuk TBC dapat dianggap positif. Tongkat Koch ditemukan pada abses purulen, kelenjar getah bening, efusi asites, eksudat pleura, urin, cairan serebrospinal;
• Tingkat sedimentasi eritrosit meningkat dengan infeksi apa pun, termasuk TBC;
• PCR memungkinkan Anda mengidentifikasi patogen tertentu, tetapi penelitiannya mahal;
• Diaskintest menentukan tuberkulosis paru, tetapi sering memberikan hasil negatif pada lokalisasi infeksi di luar paru.

Diagnosis TB modern dengan penggunaan metode yang kompleks memungkinkan untuk menentukan mikobakterium dalam tubuh dengan tingkat keandalan yang tinggi. Menggunakan metode yang ada, proses atau infeksi aktif terdeteksi. Kami hanya perlu waktu untuk menghubungi para ahli!

Diagnosis PCR tuberkulosis

TBC adalah infeksi spesifik, fokusnya mungkin pada jaringan manusia selama bertahun-tahun, dan kemudian menyebar selama beberapa bulan. Ini adalah penyakit kronis yang rejimen pengobatan optimalnya sulit dipilih. Salah satu alasan untuk ini adalah keterlambatan diagnosis, ketika mikobakteri, sementara di tubuh manusia, telah beradaptasi dengan banyak obat.

Apa metode diagnosis modern yang ada? Diagnosis PCR - apa itu? Bagaimana penelitian ini dilakukan? Dalam kasus apa TBC didiagnosis dengan metode ini dan apa esensinya?

Apa itu diagnosa PCR

Ini adalah salah satu metode paling modern untuk mendiagnosis tidak hanya penyakit, tetapi juga deteksi bahan biologis. Diagnosis PCR ditemukan relatif baru-baru ini. Sekitar 30 tahun yang lalu pada tahun 1983, seorang ahli biokimia Amerika, Carey Banks Mullis, mengusulkan skema pemulihan yang kompleks untuk bahan biologis mikroorganisme dalam satu segmen pendek. Berkat penemuannya, ilmuwan dianugerahi penghargaan tertinggi - Hadiah Nobel.

Apa itu - PCR diagnosis infeksi? Polymerase chain reaction (PCR) adalah diagnosis deteksi penyakit virus, berdasarkan metode rekayasa genetika. Ini banyak digunakan dalam mikrobiologi medis, imunologi dan virologi. Metode ini bersifat universal dan membantu membuat diagnosis dengan sejumlah kecil bahan. Infeksi dapat dideteksi secara harfiah pada jam-jam pertama infeksi itu, jauh sebelum gejala pertama penyakit muncul.

Metode ini terdiri dari memperoleh dari bahan dari orang yang sakit bukan patogen itu sendiri, tetapi fragmen genom (partikel DNA), biosintesisnya dengan penentuan selanjutnya ke kelas mikroorganisme mana materi genetik yang diperoleh dimiliki dengan menggunakan metode genetik molekuler.

Terlepas dari kenyataan bahwa ini adalah proses yang kompleks, butuh waktu jauh lebih sedikit daripada banyak metode biologis untuk mendeteksi agen infeksi. Hanya dalam beberapa jam, mikroorganisme dapat dideteksi oleh PCR. Untuk melakukan ini, tidak perlu mengisolasinya dari lingkungan (darah, cairan serebrospinal, sputum) dan menumbuhkannya dalam waktu lama pada media nutrisi buatan. Sudah cukup bahwa fragmen kecil untai DNA dari agen infeksi hadir dalam bahan yang diteliti.

Dasar dari reaksi adalah kemungkinan di bawah kondisi buatan (in vitro) untuk membuat sintesis molekul asam nukleat dari agen infeksi.

Apa yang dibutuhkan untuk PCR?

1. Primer adalah segmen DNA dari mana biosintesis atau penciptaan dimulai.
2. Nukleotida atau senyawa kompleks yang menjadi dasar molekul DNA atau RNA.
3. Reaksi rantai polimerase tidak mungkin terjadi tanpa adanya polimerase, yang merupakan enzim yang mempercepat PCR.

Tahapan diagnostik PCR

Bagaimana diagnosis molekuler dilakukan oleh PCR? Prosedurnya sederhana dan membutuhkan waktu singkat, dengan mempertimbangkan pengumpulan materi.

1. Sebelum memulai penelitian, mereka mengambil bahan biologis yang diperlukan - ini adalah air cuci bronkial, darah, isi lambung, dahak. Jenis bahan biologis tergantung pada patogen yang dicurigai.
2. Denaturasi atau penghancuran struktur primer DNA, yang terdiri dari dua rantai. Inti dari tahap ini adalah untuk memisahkan dua sirkuit di bawah pengaruh suhu tinggi (maksimum adalah 98 ºC, yang berlangsung tidak lebih dari dua menit).
3. Pada tahap PCR berikutnya, yang disebut anil, suhu berkurang beberapa derajat sehingga primer akan mengikat untai DNA.
4. Perpanjangan, di mana sintesis molekul yang diinginkan berlangsung secara langsung.

Akibatnya, hanya 25-30 siklus yang menerima jumlah salinan DNA mikroorganisme yang diperlukan, yang mudah dikenali.

Apakah PCR memerlukan diagnosis TB?

Tidak mungkin bagi semua orang yang dicurigai tuberkulosis untuk melakukan PCR, karena metode ini membutuhkan peralatan yang mahal. Tidak semua klinik umum mampu membelinya. Selain itu, kebetulan bahwa metode biasa dalam mendiagnosis infeksi pada kebanyakan kasus juga membenarkan diri mereka sendiri.

Ini termasuk:

• survei pasien, anamnesis;
• pemeriksaan lengkap dari orang tersebut;
• sebuah studi menggunakan tes tuberkulin Mantoux;
• radiografi atau fluorografi;
• diagnostik komputer jika perlu;
• metode penelitian mikrobiologis: pemeriksaan mikroskopik dan pemeriksaan bakteriologis dahak.

PCR untuk TBC dilakukan dalam kasus-kasus khusus ketika sulit untuk membuat diagnosis atau tidak mungkin untuk melakukan metode instrumental lainnya.

Meskipun ada banyak metode diagnostik, kejadian TB terus bertambah. Saat ini, tidak hanya pertumbuhannya, tetapi juga fitur lainnya:

• penyakit ini sering terjadi dalam bentuk yang parah;
• jumlah kasus fatal meningkat;
• semakin resisten terhadap kemoterapi modern didiagnosis bentuk penyakit.

Keengganan orang itu sendiri untuk menjalani pemeriksaan medis rutin setiap tahun, penolakan vaksinasi mengarah pada penyebaran tuberkulosis. Dalam kondisi seperti itu, kita memerlukan metode penelitian yang cepat, informatif dan efektif yang harus dapat diakses oleh anak-anak dan orang dewasa. Semua metode diagnostik di atas jauh lebih rendah daripada PCR.

Manfaat mendiagnosis TB dengan PCR

Penelitian ini, meskipun baru, telah membuktikan dirinya dengan baik, terutama dalam kasus kontroversial di mana tidak mungkin untuk membuat diagnosis karena sejumlah alasan.

Berkat PCR, jauh lebih mudah untuk mendeteksi agen penyebab TBC dalam bahan uji.

Keuntungan dari diagnosa PCR adalah sebagai berikut.

1. Ini adalah analisis cepat. Sebuah fragmen kecil dari molekul DNA dapat digunakan untuk mendiagnosis hanya dalam beberapa jam (sekitar lima), yang berhasil digunakan dalam situasi darurat ketika, misalnya, sebelum operasi perlu untuk menentukan apakah seseorang sakit dengan TBC.
2. Analisis PCR diperbolehkan jika metode lain tidak tersedia atau dilarang (untuk mendeteksi TB paru, kadang-kadang Anda harus mengambil beberapa gambar radiografi, yang akan menjadi radiasi dosis besar).
3. Dengan bantuan PCR, setiap lingkungan biologis diperiksa untuk mengetahui adanya patogen di dalamnya. Misalnya, Anda dapat melakukan penelitian cairan serebrospinal, jika ada kecurigaan meningitis tuberkulosis.
4. Diizinkan diagnosis PCR penyakit menular pada anak-anak, karena metode ini aman.
5. Memungkinkan Anda mengidentifikasi patogen pada setiap tahap penyakit.
6. Sensitivitas PCR yang tinggi memungkinkan untuk mendeteksi Mycobacterium tuberculosis, bahkan jika hanya ada beberapa mikroorganisme dalam bahan biologis.
7. Adalah baik untuk melakukan diagnosis kekambuhan penyakit.

Setelah semua membaca PCR tampaknya metode diagnostik yang hampir sempurna, yang harus membuat semua orang dengan kecurigaan tuberkulosis. Tetapi ada juga kelemahan di sini, mereka harus diperhitungkan.

Kekurangan PCR dalam diagnosis tuberkulosis

Saat ini, diagnostik semacam itu lebih jarang terjadi daripada keteraturan. Dan untuk ini ada alasannya.

1. Ini adalah metode penelitian yang mahal. Di banyak klinik, peralatan untuk PCR tidak ada karena biayanya yang tinggi, tetapi analisis masih dapat dilakukan di laboratorium berbayar.
2. Segera setelah perawatan, mikobakteri mati atau hidup dalam jumlah kecil mungkin masih ada dalam tubuh manusia (hasilnya akan positif selama diagnosa PCR), sehingga metode ini tidak dapat diandalkan saat ini, tidak masuk akal untuk melakukannya.
3. Mutasi mikobakteri menyebabkan PCR tidak efektif - urutan untai DNA normal tidak dapat disintesis.
4. Penting untuk memilih lingkungan yang tepat untuk penelitian, darah diambil hanya jika diduga terinfeksi (sepsis), tidak perlu mengambil dahak jika ada masalah tuberkulosis organ sistem saraf. Dalam hal ini, PCR tidak akan dapat mendeteksi patogen dan diagnosis tidak akan informatif.

Indikasi untuk mendeteksi TB menggunakan analisis PCR

Diagnosis PCR tuberkulosis dilakukan paling sering pada kasus kontroversial. Kapan dokter merujuk penelitian ini?

1. Jika sulit untuk membuat diagnosis menggunakan metode yang tersedia biasa, tetapi ada kontak dengan pasien dengan TBC.
2. Dalam kasus ketika seseorang tidak dapat dikirim ke klinik untuk menjalani tes rutin rutin untuk TB, lebih mudah untuk memeriksanya menggunakan PCR, karena dahak untuk tes dapat dikirim dalam toples dan diagnosa dikonfirmasi dalam beberapa jam.
3. Jika seseorang akan menjalani operasi darurat dan sangat mendesak untuk mengetahui apakah dia sakit TBC.
4. Jika perlu, seorang wanita hamil juga lebih baik untuk memeriksa TBC menggunakan PCR, karena metode ini aman.
5. Pada basis berbayar, siapa pun yang belum didiagnosis dengan TB telah dikonfirmasi menggunakan metode bakteriologis dan fluoroskopi. Hal ini terjadi ketika lesi di paru-paru tidak terlihat dalam gambar langsung, dan orang selama pengiriman dahak untuk penelitian tidak dapat mengikuti rekomendasi untuk pengumpulan bahan yang benar. Dalam hal ini, orang tersebut khawatir tentang semua gejala karakteristik TB paru.
6. Ketika ada keraguan tentang hasil tes Mantoux.
7. Lebih disukai untuk melakukan diagnosis PCR tuberkulosis pada anak-anak. Prosedur ini aman, tidak menciptakan paparan radiasi tambahan, dan efektif dalam mendeteksi bentuk penyakit yang sulit didiagnosis.

Diagnosis tuberkulosis yang tepat waktu adalah kunci untuk perawatan yang diresepkan dengan benar dan mengurangi penyebaran penyakit. Seringkali, metode deteksi penyakit yang sudah dikenal tidak selalu efektif. Oleh karena itu, PCR saat ini adalah salah satu cara yang paling dapat diandalkan dan aman untuk mendeteksi infeksi pada tahap awal perkembangannya.

Analisis PCR (diagnosis) tuberkulosis

Tuberkulosis atau konsumsi - salah satu penyakit menular paling populer di abad ke-21. Patogennya adalah mikrobakteri khusus - stik Koch.

Penyakit ini menyebar tidak hanya ke paru-paru, tetapi juga ke otak, pencernaan, sendi atau tulang belakang, sistem kemih, dan kulit.

Menurut WHO, 10 juta orang menderita TBC setiap tahun, yang 3 juta di antaranya fatal.

Situasi ini sangat menyedihkan di wilayah negara-negara CIS, di sini epidemi TB terjadi secara berkala. Rusia, Kazakhstan, Ukraina dikepalai oleh peringkat yang menyedihkan tentang penyebaran infeksi ini.

Infeksi mudah ditularkan oleh tetesan udara atau melalui sistem pencernaan, mempengaruhi organ vital, dan juga dapat dengan cepat beradaptasi dengan obat polimer dan kemoterapi.

Salah satu faktor utama keberhasilan pengobatan TB adalah deteksi infeksi yang tepat waktu.

Metode diagnostik

Manusia telah menemukan banyak metode untuk mengenali penyakit berbahaya. Diagnosis TBC dibagi menjadi instrumen dan laboratorium.

Dalam kasus pertama, tes darah untuk TBC, serta dahak, urin.

Kelompok kedua adalah penelitian menggunakan sinar-X dan endoskopi. Metode instrumental untuk mendiagnosis TB, pada gilirannya, adalah radiasi dan pembedahan.

Jenis metode radiasi untuk menemukan penyakit

• Fluorografi adalah metode mendiagnosis penyakit yang dikenal oleh setiap penduduk CIS. Dengan menggunakan rontgen, paru-paru dan kelenjar getah bening hilar diperiksa.
• Rontgen dada - mirip dengan fluorografi, tetapi metode yang lebih baik untuk mendeteksi infeksi. Gambar diperoleh secara lebih rinci dan dalam dua proyeksi, tetapi prosedur ini sekitar enam kali lebih mahal. Biasanya digunakan setelah kecurigaan serius dari penyakit muncul.
• Computed tomography dilakukan sebagai diagnosis tambahan, juga digunakan setelah alasan yang baik untuk adanya infeksi.

Metode diagnosis bedah termasuk endoskopi bronkial, serta mediastinoscopy dan thoracocoscopy.

Metode pertama adalah mempelajari pohon bronkial paru-paru dengan bantuan "pemeriksaan" pada organ ini. Dua metode yang tersisa memungkinkan untuk mempelajari bagian pleural paru dengan menusuk dada.

Ketiga metode ini adalah intervensi bedah serius dan paling sering digunakan dalam proses perkembangan penyakit.

Tes laboratorium meliputi:

• Analisis dahak untuk basil tuberkel.
• Pemeriksaan mikroskopis.
• Diagnosis PCR tuberkulosis

Apa itu diagnosis PCR?

Salah satu metode paling canggih dalam diagnosis laboratorium spesialis infeksi adalah reaksi berantai polimerase.

Metode ini dikembangkan oleh ilmuwan terkenal AS Carrie Mullis pada tahun 1983, di mana ia memenangkan Hadiah Nobel.

Analisis PCR adalah isolasi partikel DNA dari dahak, darah, cairan serebrospinal, tinja, dll. untuk biosintesis mereka selanjutnya.

Dengan bantuan studi genetik molekuler yang kompleks, sifat mikroba dalam tubuh pasien ditentukan.

Jenis analisis untuk TB ini dilakukan dalam beberapa tahap:

• Pertama, sampel biologis diambil. Bahan ditempatkan dalam wadah khusus dan dikirim ke laboratorium.
• Di pusat penelitian, analisis dipanaskan hingga 97 derajat. Ini memungkinkan untuk menghancurkan struktur genom DNA mikroorganisme, yang terdiri dari beberapa rantai.
• Suhu secara khusus diturunkan sehingga primer (peserta DNA dari mana proses biosintesis dimulai) dapat terhubung ke rantai asam deoksiribonukleat apa pun.
• Setelah itu, biosintesis molekul yang diperlukan untuk deteksi dilakukan.

Setelah 25-30 siklus berulang dalam proses penelitian laboratorium, dokter memiliki kesempatan untuk mengenali apakah mikroorganisme menular ada di tubuh pasien atau tidak.

Keuntungan dan kerugian

PCR untuk TBC adalah teknik diagnostik paling modern. Metode ini memungkinkan untuk mendeteksi infeksi pada setiap tahap dengan keandalan tinggi. Manfaat:

• Kecepatan - belajar tidak lebih dari lima jam. Hasil tes untuk mikroba tuberkulosis dapat ditemukan dalam waktu 24 jam.
• Keselamatan - Metode PCR tidak memiliki kontraindikasi usia.
• Ketepatan waktu - teknik ini memungkinkan Anda untuk mendeteksi TB pada tahap-tahap tersebut ketika penyakit tidak memiliki gejala.
• Tingkat akurasi yang tinggi - jika hanya ada beberapa mikroorganisme dalam analisis, mereka akan ditemukan menggunakan reaksi berantai polimerase. Juga, teknik ini memungkinkan untuk dengan mudah mengidentifikasi agen penyebab TBC.
• Keserbagunaan - diagnostik digunakan tidak hanya untuk mendeteksi konsumsi, tetapi juga untuk penyakit lain seperti klamidia, gonore, dll.

Meskipun ada banyak keuntungan, penggunaan teknik ini dalam praktik medis domestik adalah pengecualian daripada aturan. Ada sejumlah alasan untuk ini.

Kerugian dari metode ini adalah:

• Tingginya biaya survei.
• Metode ini tidak cocok untuk mereka yang telah menjalani terapi, karena keberadaan bakteri Koch yang mati dapat menyebabkan hasil positif palsu.
• Dalam kasus mutasi mikroorganisme menular, genom mereka tidak dapat dikenali dengan membuat kesimpulan yang salah.
• Penting untuk memilih lingkungan deteksi yang tepat. Misalnya, hasil tes darah untuk PCR untuk tuberkulosis (entri pengenceran) akan negatif jika sistem saraf terinfeksi.
• Tidak selalu mungkin untuk menerapkan metode ini pada pasien yang didiagnosis dengan lesi paru-paru.

Selain itu, analisis tuberkulosis semacam itu membutuhkan peralatan modern yang tidak dimiliki 90 persen rumah sakit. Dalam CIS, analisis tersebut dapat dilakukan oleh jaringan klinik Invitro.

Ketentuan analisis

Rekomendasi untuk pasien yang menjalani tes untuk TB bervariasi tergantung pada jenis analisis yang mereka lewati.

Ketika mengambil darah untuk PCR, perlu untuk berhenti merokok satu jam sebelum prosedur, bagi dua orang untuk berhenti minum minuman beralkohol dan makanan berlemak.

Dianjurkan juga untuk menahan diri dari aktivitas fisik, juga tidak mungkin untuk mengambil darah untuk TBC saat perut kosong.

Saat mengambil swab dari mulut dan rongga hidung, Anda tidak dapat makan 2-4 jam sebelum prosedur, jika tidak maka tidak akan informatif. Juga, jangan minum alkohol.

Untuk pembacaan yang akurat, analisis dilarang merokok lebih awal dari satu jam sebelum prosedur. Pada malam hari, jangan menyikat gigi dan menggunakan semprotan dan semprotan mulut.

Jika Anda mencurigai tuberkulosis pada sistem urogenital, pasien selama 2-3 hari sebelum melahirkan harus mengecualikan seks, selama 2-3 jam sebelum prosedur, jangan pergi ke toilet "dengan cara kecil". Organ genital harus dicuci dengan air putih tanpa alat khusus.

Wanita disarankan untuk tidak menggunakan tablet vagina, lilin, bola, dan juga untuk menahan diri dari pengujian pada hari-hari kritis.

5 hari sebelum melahirkan, hasilnya perlu untuk meninggalkan prosedur kolposkopi, serta USG transvaginal,

Kapan diagnostik PCR digunakan?

Tidak setiap klinik memiliki diagnosis yang sedemikian kompleks, tetapi dokter semakin menggunakan metode penelitian seperti itu. Biasanya analisis semacam ini dilakukan dalam situasi khusus.

• Dalam hal hasil manta yang meragukan, tes darah untuk TBC dapat digunakan.
• Dalam kasus di mana pasien telah melakukan kontak dengan orang yang terinfeksi, tetapi dokter yang hadir tidak dapat secara akurat menentukan diagnosis.
• Dalam kasus operasi darurat, ketika itu perlu untuk mengetahui dalam waktu singkat apakah pasien memiliki infeksi ini.
• Ketika seorang pasien hamil, ketika metode penelitian lain tidak cukup aman untuk bayi yang baru lahir.

Perlu dicatat bahwa diagnosis ini direkomendasikan untuk anak-anak karena keamanannya.

Jika seorang siswa memiliki kontraindikasi terhadap tes TBC, ia dapat mengambil tes darah untuk TBC alih-alih mantel dengan PCR.

Apa itu analisis PCR untuk TBC

Metode inovatif untuk mendeteksi mikroorganisme, ditemukan oleh ilmuwan Cary Mullis pada akhir abad terakhir - analisis PCR. Dia menerima Hadiah Nobel untuk tulisannya. Sepenuhnya proses ini disebut reaksi berantai polimerase. Ini terdiri dalam pemulihan jenis mikroorganisme dalam biomaterial yang disediakan menggunakan fragmen DNA pendek. Ini memungkinkan Anda untuk mendeteksi infeksi pada tahap awal dan memulai perawatan segera, tanpa mengarah pada gejala dan komplikasi serius.

Apa analisisnya?

Diagnosis oleh PCR adalah untuk mendapatkan segmen DNA patogen dari bahan biologis dan menyelaraskannya dalam rantai yang benar. Ini memungkinkan identifikasi mikroorganisme tempat sel berada.

Prosedur ini dilakukan dalam tiga tahap:

1. Koleksi bahan biologis.
2. Identifikasi dan penyelarasan DNA.
3. Pengakuan infeksi.

Penelitian ini membutuhkan peralatan medis khusus - amplifikasi. Itu dilengkapi dengan kamera, di mana bahan yang dipelajari berinteraksi dengan suhu tinggi dan enzim kimia. Di pintu keluar, teknisi laboratorium memiliki rantai DNA panjang dari agen penyebab penyakit, jika ada satu di tubuh manusia.

Cara mempersiapkan diagnosis

Analisis PCR adalah proses rekayasa genetika yang kompleks yang membutuhkan akurasi dan keseriusan dari teknisi laboratorium dan pasien. Peran besar dalam kebenaran hasil analisis dimainkan oleh persiapan untuk prosedur, yaitu, pengumpulan bahan yang benar.

Sumber utama informasi tentang penyakit ini adalah:

Pilihan lain dapat digunakan, cairan, jika perlu, diambil untuk analisis dari berbagai organ.

Untuk pasien, ada aturan tertentu yang harus diikuti sebelum prosedur. Jika ada tes darah, dilarang selama 8 jam sebelum pengambilan:

• makan makanan;
• untuk merokok;
• minum minuman beralkohol;
• minum obat di dalam.

Di malam hari, sebelum mengumpulkan dahak, obat diminum untuk mengencerkannya dan memfasilitasi ekspektasi. Di pagi hari, kumpulkan bahan setelah membersihkan rongga mulut.

Urin dikumpulkan dalam botol steril di pagi hari dengan perut kosong, setelah dicuci, sebelum minum obat apa pun.

Jika seseorang menggunakan antibiotik, maka analisis reaksi berantai polimerase harus ditunda, jika tidak, hasil PCR tidak dapat diandalkan. Dahak atau darah harus disumbangkan dua minggu setelah akhir pengobatan.

Bagaimana proses mengidentifikasi bakteri

Secara singkat, prosesnya adalah mengisolasi sebagian dari DNA. Penggunaan metode modern rekayasa genetika memungkinkan kita untuk menentukan jenis mikroorganisme. Selain itu, bahan untuk analisis perlu sedikit.

Secara teknis, ini adalah prosedur yang sangat rumit, tetapi membutuhkan waktu lebih sedikit daripada studi bakteriologis klasik. Patogen tidak perlu diisolasi dari biomaterial, tidak perlu tumbuh selama beberapa minggu. Pada hari pengiriman, pasien sudah dapat mengetahui hasil analisisnya.

Seluruh proses PCR berlangsung secara bertahap:

1. Pekerjaan sedang berlangsung dengan bentuk utama DNA, yang pada suhu tinggi, mendekati 100 derajat, dibagi menjadi dua rantai.
2. Suhu menurun, benang terhubung ke fragmen asam nukleat - primer.
3. Terjadi perpanjangan - sintesis struktur molekul.

Seluruh sesi terdiri dari sekitar tiga puluh prosedur seperti itu, mengulangi siklus sebagai reaksi berantai. Ini diperlukan untuk membuat jumlah sel di mana bakteri yang dihasilkan menjadi dikenali.

Kesimpulan penelitian

Deskripsi hasil PCR (reaksi berantai polimerase) memberi dokter TB, sederhana atau digunakan. Dalam kasus pertama, deskripsi hanya akan berisi informasi tentang ada atau tidaknya tongkat Koch. Jika penguraiannya terinci, dari situ Anda bisa mengetahui sejauh mana penyakit itu, fokusnya. Menurut kriteria ini, adalah mungkin untuk menentukan pengobatan yang paling tepat untuk TBC di setiap kasus.

Analisis polimerase dari reaksi berantai tidak membedakan antara patogen hidup dan mati, dan hanya berbicara tentang keberadaannya. Oleh karena itu, masuk akal untuk lulus tes kedua untuk tuberkulosis hanya 3-4 minggu setelah terapi yang ditentukan oleh dokter.

Jika hasilnya positif, tulisan "Mycobacterium tuberculosis" dimasukkan pada kesimpulan. Jika ada hasil negatif, di sebelah nama biologis bakteri ada tanda "tidak terdeteksi." Analisis mungkin positif palsu. Ini jarang terjadi - dalam kasus pelanggaran teknik melakukan studi PCR atau di hadapan mikroorganisme yang tidak dapat hidup. Kesimpulan akhir tentang penyakit ini hanya dapat dibuat oleh dokter TB.

Keuntungan dari metode ini

Diagnosis PCR tuberkulosis telah mendapatkan popularitas karena berbagai alasan. Ini memiliki banyak keuntungan, termasuk:

1. Akurasi penelitian. Saat menganalisis teknologi, dimungkinkan untuk mengidentifikasi bakteri, meskipun mereka hadir dalam jumlah kecil.
2. Hasil cepat. Seluruh proses dari mengumpulkan materi hingga kesimpulan selesai membutuhkan waktu sekitar 5 jam. Jika dibandingkan dengan menabur, ia harus menunggu hingga beberapa minggu.
3. Keamanan penuh untuk orang tersebut, tidak seperti fluorografi dengan radiasinya.
4. Biomaterial cair apa pun digunakan. Untuk PCR pada TB paru, dahak memberikan informasi yang paling akurat, pada meningitis tuberkulosis, sampel diambil dari sumsum tulang belakang. Tes darah membantu mengidentifikasi fokus infeksi lokal.
5. Kepekaan bakteri terhadap antibiotik diuji. Ini memungkinkan Anda meresepkan perawatan yang benar.
6. Diagnosis dini. Anda dapat belajar tentang keberadaan penyakit sebelum timbulnya gejalanya.

Selain aspek positif, ada juga kelemahannya. Yang utama adalah harga. Analisis PCR tidak murah, yang terkait dengan penggunaan peralatan mahal. Kerugian lain adalah kebutuhan untuk menunggu waktu untuk tes ulang setelah pengobatan TB. Terkadang hasil tes positif palsu. Ini terjadi karena mutasi bakteri.

Saat PCR dibutuhkan

PCR untuk TB paru tidak memiliki kontraindikasi dan benar-benar aman. Karena itu, ada situasi dan penyakit tertentu saat ini adalah satu-satunya kemungkinan penelitian.

Ini termasuk:

• kehamilan;
• kontak dengan pasien TB;
• kesulitan dalam menentukan diagnosis penyakit paru;
• pemeriksaan sebelum operasi;
• reaksi alergi;
• Infeksi HIV;
• usia muda.

Anda dapat menggunakan metode PCR ke arah yang dikeluarkan dalam phthisiology, serta dokter anak, dokter atau paru-paru.

Apa yang bisa menggantikan diagnosis PCR tuberkulosis

Jenis survei lain tidak menjadi usang, tetapi terus digunakan. Mereka digunakan dalam kasus-kasus di mana tidak mungkin untuk melakukan PCR untuk TBC. Selain itu, metode modern tidak ideal, terkadang indikatornya dipertanyakan dan perlu diperiksa ulang.

Metode berikut membantu menentukan keberadaan tuberkulosis pada seseorang:

• diagnosis tuberkulin (Mantoux);
• fluorografi;
• pengujian bahan biologis untuk flora;
• rontgen paru-paru.

Studi-studi ini gratis dan tersedia untuk semua orang. Tetapi mereka memiliki kekurangan:

• Tes TBC menyebabkan alergi. Kontraindikasi pada penyakit kulit.
• Studi X-ray disertai dengan radiasi, yang tidak berlaku untuk anak-anak, orang dengan defisiensi imun dan wanita hamil.
• Analisis bakteriologis membutuhkan waktu lebih lama, hasilnya dapat menunggu hingga satu bulan.

Alternatif bukan jaminan kesimpulan yang benar seratus persen. Mereka paling sering digunakan untuk tujuan pencegahan. Diagnosis TBC oleh PCR memberikan informasi yang paling dapat diandalkan. Jika memungkinkan, lebih baik menggunakannya.

Keunikan TBC pada anak-anak dan kebutuhan akan PCR

Anak harus dilindungi dari penyakit ini - infeksi TBC dapat menyebabkan kerusakan serius pada tubuh dengan kekebalan yang belum terbentuk sepenuhnya.

Setelah memasukkan tongkat Koch ke dalam organisme anak-anak, perkembangan penyakit melewati tahap-tahap berikut:

• Laten. Itu berlangsung hingga satu tahun, tanpa menunjukkan gejala apa pun.
• Keracunan. Mempengaruhi kesehatan secara keseluruhan. Muncul kelemahan, apatis, kurang nafsu makan, kantuk dan penurunan kinerja. Temperatur sedikit meningkat secara konstan.
• Bentuk utama dari penyakit ini. Tuberkulosis terlokalisasi, membentuk fokus penyakit. Anak menderita batuk, sesak napas, sakit kepala, pembengkakan kelenjar getah bening.
• Tuberkular bronkoadenitis. Gejalanya adalah nyeri pada tulang belikat, batuk dengan nada suara yang berbeda, mengi.

Biasanya, tuberkulin disuntikkan untuk mengidentifikasi infeksi di bawah kulit anak. Jika jenis pemeriksaan ini merupakan kontraindikasi, maka PCR untuk TBC adalah pilihan yang sangat diperlukan untuk diagnosis. Anak-anak biasanya melakukan tes darah, tetapi dahak dikumpulkan jika perlu. Pada kecurigaan sedikit pun dari keberadaan TBC, penelitian tambahan dilakukan untuk memastikan hasil positif dan segera memulai pengobatan pada tahap awal, mencegah perkembangan penyakit.

Metode penelitian modern selalu lebih cepat dan lebih dapat diandalkan. Sangat disayangkan bahwa karena peralatan mahal untuk melakukan tes seperti itu ada kemungkinan tidak di semua lembaga medis dan daerah. Cara melakukan pemeriksaan biasanya dipilih oleh dokter, tetapi pasien memiliki hak untuk memilih. Jika Anda harus mengikuti tes PCR, beri tahu kami tentang hal itu di komentar. Jika artikel itu bermanfaat bagi Anda, bagikan di jejaring sosial - mungkin itu akan membantu teman Anda.